miR-301a调控胰腺癌干细胞干性的分子机制及清热化湿中药的干预研究

Recurrence and metastasis is the key factor of curative effect and long-term survival in pancreatic cancer(PC). Cancer stem cells(CSCs) is considered to play an important role on recurrence and metastasis. However, the mechanism remains unclear. Our preliminary research suggested that miR-301a was significantly increased in PC tissues and promoted PC cell proliferation. Further study indicated that miR-301a might be involved in maintaining CSCs stemness and QYHJ could inhibit CSCs stemness. Therefore, we assumes that QYHJ may inhibit the stemness of PC-CSCs by down-regulates miR301a expression. Therefore, in this project, we use human PC-CSCs as the research subject to conform the effect of miR-301a and QYHJ. We plan to assess the interference of repressing miR-301a on stem cell sphere-forming capacity, stemness related genes expression, cell proliferation, migration, invasion in vitro and in vivo by Gene transfection, RT-PCR, Western blot, small animal PET/CT and other technical methods.

胰腺癌复发、转移是影响患者疗效和长期生存的关键。肿瘤干细胞（CSCs）是胰腺癌复发、转移的重要因素，但其机制尚不清楚。我们前期研究提示，miR-301a在胰腺癌组织中高表达，与胰腺癌细胞的增殖密切相关。进一步的研究发现miR-301a可能是胰腺癌CSCs维持干性的重要调节因子，而清胰化积方（QYHJ）可抑制胰腺癌CSCs干性，又能下调组织中miR-301a的表达水平。这提示QYHJ可能通过下调miR-301a起到抑制胰腺癌CSCs干性的作用。本项目拟以人胰腺癌CSCs为研究对象，采用体外与体内实验相结合方法，应用基因转染、实时定量RT-PCR、Western-blot、小动物PET/CT等技术方法，研究抑制miR-301a表达对胰腺癌CSCs干性、干性相关基因表达、体内成瘤及转移等指标的影响。验证miR-301a与胰腺癌CSCs之间的关系以及QYHJ抑制胰腺癌复发、转移的作用机制。

胰腺癌复发、转移是影响患者疗效和长期生存的关键。肿瘤干细胞（CSCs）是胰腺癌复发 、转移的重要因素，但其机制尚不清楚。我们研究发现miR-301a在胰腺癌组织中高表达，与胰腺癌细胞的增殖密切相关。进一步的研究发现miR-301a是胰腺癌CSCs维持干性的重要调节因子，而清胰化积方（QYHJ）可抑制胰腺癌CSCs干性，又能下调组织中miR-301a的表达水平。所以QYHJ与miR-301a及CSCs之间的关系值得进一步研究。本项目以人胰腺癌CSCs为研究对象，建立稳定抑制miR- 301a表达的Bxpc-3- CSCs细胞，结果发现miR-301a 表达抑制对胰腺癌 CSCs 成球能力、体外侵袭、转移能力均有影响，且能抑制其体内成瘤能力。且抑制miR-301a后BTG1、STAT3表达下降，FoxQ1、Sox4未见明显改变。用含药血清QYHJ干预后，发现QYHJ能明显降低细胞中的miR-301a的表达水平，QYHJ含药血清也能抑制细胞成球及其侵袭、转移能力。这提示QYHJ可能通过下调miR-301a起到抑制胰腺癌CSCs干性的作用。