抗RPLP0抗体通过MAPK-P38/ERK/JNK信号通路引起系统性红斑狼疮皮肤损伤的机制研究

The skin damage of systemic lupus erythematosus(SLE) has been characterized by keratinoyte necrosis and apoptosis, basal cell liquification and inflammatory cell infiltration in dermis. Our previous research demonstrated that anti-acidic ribosomal protein P0 antibody (anti-RPLP0) was critical in the pathogenesis of SLE skin injury. However, the mechanism remains unexplored. RPLP0 was reported to induce cancer cells undergoing cell cycle arrest and apoptosis by interacting with MAPK signaling pathway. The signaling pathway in epidermal keratinocytes also played an essential role in the development of inflammatory skin diseases including psoriasis and pemphigus. Therefore, we hypothesized that anti-RPLP0 antibody combines with RPLP0 antigen, induces SLE-related cytokines and chemokines production by initiating MAPK/P38/ERK/JNK pathway, which subsequently recruits pDC and CD3+ inflammatory cells and eventually causes lupus skin damage.

系统性红斑狼疮（SLE）皮肤损伤的基本病理特点：表皮细胞凋亡、坏死，基底细胞液化变性；真皮附属器周围炎症细胞浸润。我们前期研究发现抗核糖体P0蛋白（RPLP0）抗体是引起SLE皮肤损伤的关键性、致病性抗体。但是，该抗体引起上述损伤的机制还不清楚。RPLP0广泛存在于真核细胞膜、胞浆和胞核中。有研究证明RPLP0蛋白通过MAKP/ERK1/2途径调节肿瘤细胞功能。而MAKP信号通路在银屑病、天疱疮等炎症性皮肤病的表皮细胞中广泛存在，并发挥重要致病性。据此我们推测抗RPLP0抗体引起SLE皮肤损伤的机制为：抗体与表皮细胞RPLP0蛋白结合，通过活化MAPK/P38/ERK/JNK途径，促进表皮细胞凋亡，SLE皮肤损伤相关前炎症因子（IFNa，TNFa和IL-1）和趋化因子（CXCL9, CXCL10）释放；并通过这些趋化因子，促进pDc和CD3+ T细胞向局部皮肤聚集，最终导致SLE皮肤损伤。

我们前期研究发现抗核糖体P0蛋白（RPLP0）抗体是引起SLE皮肤损伤的关键性、致病性抗体。但是，该抗体引起上述损伤的机制还不清楚。有研究证明RPLP0蛋白通过MAKP通路调节肿瘤细胞功能，而此通路在银屑病、天疱疮等炎症性皮肤病的表皮细胞中发挥重要致病性。我们推测抗RPLP0抗体通过MAPK/P38/ERK/JNK途径，调控表皮细胞免疫表型，通过CXCL10等炎症因子促进致病型T细胞募集最终导致狼疮皮肤损伤。我们的研究首先确证了抗RPLP0抗体可通过上调角质形成细胞IL-12、IFNγ、 CXCL10和G-CSF炎症因子的合成来改变其免疫表型。而非直接影响角质形成细胞的增殖、凋亡。此外，我们还从细胞信号通路层面证实了抗RPLP0抗体对角质形成细胞的调控是通过IKK/IKB/NFkB通路实现，也是最常见的炎症激活通路。而MAPK、JNK通路在此过程中并未发挥重要作用，MAPK作为参与细胞增殖分化的主要通路，这与所观察到的抗RPLP0抗体对角质形成细胞的增殖无影响相吻合。我们进一步在动物实验上证实了RPLP0蛋白足垫免疫可诱导小鼠出现狼疮样的临床表现及血清学特征。免疫后小鼠出现抗RPLP0抗体阳性，同时血清抗dsDNA、ANA抗体升高，肾脏IgG沉积，淋巴结脾脏活化T细胞增多，皮肤基底细胞液化坏死、致病性T细胞浸润的狼疮样皮肤损害病理表现。至此我们证实了对RPLP0抗原失耐受所诱发的自身免疫反应在系统性红斑狼疮，尤其是狼疮样皮肤损害中的致病作用。明确了抗RPLP0抗体通过激活NFkB通路促进角质形成细胞免疫炎性表型的发生，进一步引起致病性T淋巴细胞在免疫器官的增多以及在皮肤组织中的招募，最终导致狼疮临床表现的发生。我们的实验揭示了系统性红斑狼疮患者自身抗体参与器官特异性致病的机制，为临床解读患者自身抗体的出现及其器官特异性损害的临床意义提供理论依据。