神经干细胞自我更新及分化相关的细胞表面糖蛋白研究

细胞表面糖基化蛋白在神经干细胞自我更新及分化等重要生理过程中具有重要作用。本研究拟以国际公认的神经干细胞系C17.2-NCS为体外研究模型，利用生物质谱技术结合稳定同位素标记定量、O18/16标记定量及非标定量技术对处于自我更新与定向分化为星形胶质细胞状态的细胞表面糖蛋白进行鉴定和定量比较。筛选出一批与神经干细胞自我更新和分化相关的细胞表面受体及蛋白。在此基础上，运用western blot，RT-PCR，免疫细胞化学，RNAi技术对候选的细胞表面糖蛋白进行进一步的验证和功能研究。期望获得一些与神经干细胞自我更新及分化相关的细胞表面受体和蛋白,研究2-3种与神经干细胞自我更新及分化相关的重要细胞表面蛋白，进一步揭示神经干细胞自我更新及分化的分子机制，为神经干细胞定向分化奠定基础。

本课题利用目前日益完善的蛋白质标记和生物质谱技术，以本实验长期开展研究的神经干细胞为研究对象，对处于自我更新与定向分化为星形胶质细胞状态的细胞表面糖蛋白进行了全面的定性鉴定和定量比较。鉴定出了一批与神经干细胞自我更新和定向分化（星形胶质细胞）相关的细胞表面受体和糖蛋白。本课题总体进展顺利，完成了既定研究任务，主要在以下方面取得了进展：.1）建立了神经干细胞系C17.2-NSC增殖和AICAR诱导其向星形胶质细胞方向分化 (astroglial.Differentiation）的研究模型。.2）比较优化了细胞表面蛋白扫描技术(CSC-technology)和凝集素亲和富集技术，并应用凝集素亲和富集技术对SILAC标志的不同状态的神经干细胞（自我更新与分化为星形胶质细胞状态）的细胞表面N-型糖蛋白进行了鉴定和定量，并确定了198个糖蛋白的糖基化修饰位点。.3) 对差异的蛋白质进行了生物信息学分析，预测和验证了几个重要的参与神经干细胞定向分化的蛋白质信号通路。.通过本课题研究在Journal of Proteome Research、Methods in Molecular Biology，中国生物化学与分子生物学报等杂志发表SCI 论文1篇，专著 中的一章，应邀在20132年全国蛋白质组学会议（重庆）上做专题报告；毕业硕士研究生2名。