肺癌转移相关基因筛选的实验研究

尽管一系列的癌基因和抑癌基因已经得到确认并被阐明特征，但是导致肺癌转移的分子机制尚未完全明确。我们前期研究应用aCGH技术对Anip973和AGZY83-a两个细胞系的基因组加以分析，以明确它们中导致肿瘤形成、演进及转移的基因。发现他们具有相同的DNA拷贝变异数的基因图谱，包括39个获得的和60个缺失，共获取9个纯合子缺失片段，其中5个含有重要的肿瘤相关基因。我们确信一定是微小的差异导致了两个细胞系转移能力的不同。我们将利用微阵列技术进行表达谱检测，发现差异表达的基因，研究差异表达基因对肺癌细胞转移能力的影响。对于通过以上途径确认的对肺癌转移有影响的基因进行临床相关性研究，筛选可能的肺癌早期转移预测指标或预后指标，后期开展转化医学研究；针对在肺癌转移过程中起重要作用的基因，筛选可能的调控靶点，为靶向药物开发奠定基础。

AGZY83a和Anip973是两株人类肺腺癌细胞系，Anip973是从AGZY83a分离出来，然而Anip973的转移潜能明显高于AGZY83a。应用基因芯片检测筛选Anip973和AGZY83a中的差异表达的基因，再从中筛选出于肿瘤转移相关的基因，筛选可能的肺癌转移分子指标，为靶向治疗药物开发和个体化医疗奠定基础。细胞培养，培养AGZY83a和Anip973细胞系，抽提以上两细胞系的总RNA，检测其质量,纯化,然后逆转录合成cDNA，利用全基因组表达芯片筛选出这两组细胞系表达的差异，从而得出两组细胞系差异表达的基因谱。.从差异表达的基因中选取4个基因进行实时定量PCR的验证，与基因芯片的结果进行对比，达到评估基因芯片的准确性。通过GENEBANK检索以及PUBMED等数据库文献检索结合搜索GO分类，从差异表达的基因谱中筛选出与肺癌转移相关的基因。这两组细胞系筛选后筛选出差异表达的基因，筛选出的差异表达的基因，通过GENEBANK和PUBMED等文献检索并结合GO分类，发现与肿瘤转移相关的基因。通过基因芯片筛选，筛选出两组细胞系差异表达的基因。结果与实时荧光定量PCR验证的结果一致。在这两组细胞系差异表达的基因中，发现了多个肿瘤转移相关基因。