A型肉毒毒素抑制家兔移植颌下腺过量分泌的研究

自体颌下腺移植，以颌下腺分泌的"唾液"代替泪液，已经成为治疗重症角结膜干燥症最有效的方法之一。手术3个月后部分患者出现机会性"泪溢"，需行二次手术加以调整。本课题研究A型肉毒毒素（botulinum toxin A, BTXA）对移植腺体分泌的影响，以期解决颌下腺移植成功后部分患者泪溢的问题。课题拟以新西兰大白兔为实验动物，制作家兔颌下腺移植远期动物模型，在移植颌下腺内注射BTXA。通过观察分泌量的变化探讨BTXA治疗移植颌下腺过量分泌的效果，通过观察腺体组织学和超微结构变化、神经末梢和神经突触活性变化、SNAP-25和M受体各亚型mRNA和蛋白的表达变化、以及腺细胞发生凋亡的情况来进一步探讨BTXA调控移植颌下腺分泌的机制。本课题为移植颌下腺术后出现的泪溢探索非手术治疗的新途径，也为深入了解调控颌下腺分泌的机制提供了新思路。

自体颌下腺移植，以颌下腺分泌的"唾液"代替泪液，已经成为治疗重症角结膜干燥症最有效的方法之一。手术3 个月后部分患者出现机会性"泪溢"，需行二次手术加以调整。本课题研究A 型肉毒毒素（botulinum toxin A, BTXA）对移植腺体分泌的影响，以期解决颌下腺移植成功后部分患者泪溢的问题。本研究分为两个部分：一, BTXA抑制家兔正常颌下腺分泌的实验研究；二，BTXA抑制家兔移植颌下腺分泌的实验研究。第一部分研究发现，家兔颌下腺注射5U BTXA后1周、2周、4周和12周时，静息状态下颌下腺分泌分别减少63%、70%、54%和38%，进食状态下分别减少69%、70%、68%和41%，而腺体重量无明显变化。注射BTXA后1周、2周时，腺泡细胞萎缩，腺泡内低电子密度的分泌颗粒分泌受阻、聚集并融合变大，出现较多凋亡细胞，并且M3受体和水通道蛋白AQP5表达降低，AQP5分布的位置转向腺泡细胞胞浆中，注射后4周时开始恢复，到注射后12周时基本恢复至对照水平。这些变化可能都与注射BTXA后腺体分泌减少有关。第二部分研究，首先建立家兔改良颌下腺移植动物模型，解决传统颌下腺移植后容易出现导管堵塞的问题。研究发现，改良颌下腺移植成功3个月后注射BTXA，注射后2周和1个月时移植腺体的分泌量分别减少73.3%和62.9%，注射后3月时移植腺体的分泌量基本恢复，到6月时已完全恢复至对照水平。研究发现家兔颌下腺移植3个月后，颌下腺腺泡数目减少，排列疏松，导管增多，间质内纤维结缔组织增多。BTXA注射后1-2周，颌下腺腺泡数目进一步减少，体积缩小，排列紧密，导管数目明显增多。BTXA注射后1个月，腺泡数目有所恢复。注射BTXA后6个月，腺泡细胞结构完全恢复。研究发现，注射BTXA后2周，腺体中SNAP-25，M1、M3受体表达降低，AQP5表达降低，AQP5向胞浆内的转位增加。注射后1个月时开始恢复，3个月时恢复至对照接近水平，6个月时完全恢复。结论：A型肉毒毒素能够明显地抑制家兔正常颌下腺和移植颌下腺的分泌，作用约持续3个月。