GFP标记的神经干细胞和含NGF的组织工程支架共移植对大鼠横断脊髓损伤的修复作用

脊髓损伤是一类严重危害人类生命健康的危重疾病，常导致患者严重的终生残疾，目前尚无有效的治疗方法。由于细胞治疗技术和组织工程学技术的飞速发展，这一梦想已经有了实现的可能。根据脊髓损伤的发病机制和目前的研究现状，认为应用神经干细胞和含神经营养因子的组织工程支架共移植治疗脊髓损伤是最新、最有前途的治疗方法之一。本实验以含神经生长因子的生物可降解组织工程支架聚乳酸甘醇酸共聚物为支架，应用携带有绿色荧光蛋白报告基因的人类免疫缺陷病毒载体转染神经干细胞后，将绿色荧光蛋白标记的神经干细胞与含神经生长因子的组织工程支架共移植于大鼠脊髓全横断损伤部位，不同时间点检测运动、感觉功能恢复评定指标、形态学指标及分子生物学指标，最终判定神经干细胞和含神经营养因子的生物工程材料共移植对脊髓损伤的修复作用。目前国内外尚无此项研究的报道。通过此项研究，为脊髓损伤的治疗提供技术依据，有望在脊髓损伤的治疗领域有所突破。

脊髓损伤是一类严重危害人类生命健康的危重疾病，常导致患者严重的终生残疾，目前尚无有效的治疗方法。由于细胞治疗技术和组织工程学技术的飞速发展，这一梦想已经有了实现的可能。根据脊髓损伤的发病机制和目前的研究现状，认为应用神经干细胞和含神经营养因子的组织工程支架共移植治疗脊髓损伤是最新、最有前途的治疗方法之一。本实验以含神经生长因子的生物可降解组织工程支架聚乳酸甘醇酸共聚物为支架，应用携带有绿色荧光蛋白报告基因的人类免疫缺陷病毒载体转染神经干细胞后，将绿色荧光蛋白标记的神经干细胞与含神经生长因子的组织工程支架共移植于大鼠脊髓全横断损伤部位，不同时间点检测运动、感觉功能恢复评定指标、形态学指标及分子生物学指标，最终判定神经干细胞和含神经营养因子的生物工程材料共移植对脊髓损伤的修复作用。通过此项研究，为脊髓损伤的治疗提供技术依据，有望在脊髓损伤的治疗领域有所突破。    ..一、项目的完成情况及取得成果概述.1. 成功体外培养及鉴定胎鼠脑源性神经干细胞。HIV载体成功转染胎鼠脑源性神经干细胞，但是目前一直无法解决转染率较低的问题，我们通过应用Brdu标记神经干细胞来解决移植细胞的示踪问题。.2.脊髓半横断制作大鼠脊髓损伤动物模型的评价，从行为学和形态学方面评价，通过研究证明脊髓损伤动物模型稳定、可靠，具有进一步的推广意义，并可用于脊髓损伤的相关实验研究。.3. 初步证明神经干细胞和组织工程支架联合移植可显著促进脊髓损伤鼠神经功能的修复。本实验从行为学和形态学方面评价神经干细胞和组织工程支架联合移植对脊髓损伤鼠的功能修复情况，研究结果提示：与对照组比较，移植的神经干细胞可促进脊髓损伤鼠神经功能的修复。.4．国内核心医学期刊发表论文1篇；.6. 培养研究生3名，2名顺利毕业，1名在读。..二、存在的问题.1. 成功体外培养及鉴定胎鼠脑源性神经干细胞，并将携带有GFP报告基因的HIV载体转染至神经干细胞中，但是目前一直无法解决转染率较低的问题，课题组通过应用Brdu标记神经干细胞来解决移植细胞的示踪问题。.2. 不断完善神经干细胞移植治疗脊髓损伤的疗效评价，包括分子生物学、免疫电镜等方面的评价，进一步进行神经干细胞移植治疗脊髓损伤的分子作用机制探索，为临床应用此项技术提供依据。