基于特异性肺癌新抗原的免疫疗法在动物模型上的疗效评估

Immunotherapy using patient cancer specific Neoantigens as a vaccine has been shown its exciting curative effect on several cancer types. Although exciting results from multiple clinical trials have encouraged more and more clinical investigators to pursue this therapeutic strategy, the underlying mechanism of how neoantigen be present by dendritic cells to lymphocytes and how active lymphocytes will kill cancers cells has not been reported yet. In this study, 1) we will use PDX mouse model, which is developed by our research group, to visualize the process of presentation of neoantigen by dendritic cells to lymphocytes in vitro. 2) In addition, we will analysis the relationship of the effect of active lymphocytes and biomarkers of TMB、MSI and DNA methylation. The observation results will provide laboratory evidence of how neoantigen immunotherapy is affected. 3) We will also investigate the distribution of specific neoantigens of NSCLC patients. These results will provide stratification for immunotherapy using patient specific neoantigens.

新抗原作为免疫治疗在国际上已经有多个临床研究报道其对晚期癌症的治疗效果。然而，目前还没有基础研究探究晚期NSCLC患者免疫治疗新抗原如何被树突细胞呈递给淋巴细胞，被免疫激活的淋巴细胞如何清除肿瘤细胞。本研究目的：1)建立免疫治疗疗效动物模型，在细胞层面上观测肿瘤特异性新抗原序列表达的树突细胞和患者的淋巴细胞共孵育时，树突细胞和淋巴细胞发生的改变。2）分析新抗原免疫治疗效果与潜在生物标志物TMB、MSI、新抗原负荷以及基因组甲基化水平的相关性。3）探究NSCLC患者新抗原的分布，分析免疫治疗疗效佳者新抗原及免疫细胞的分布特性。

目前， 免疫细胞疗法和溶瘤病毒在癌症治疗中越来越重要，因为它们结合了直接溶瘤作用和抗肿瘤免疫的刺激。本研究立项拟探究晚期NSCLC患者等肿瘤的免疫治疗新抗原如何被树突细胞呈递给淋巴细胞，被免疫激活的淋巴细胞如何清除肿瘤细胞。在研究免疫调节及其疗效过程中，我们关注到溶瘤病毒的功能依赖于肿瘤微环境中的免疫反应。.我们实现了预期实验内容：1)建立免疫治疗疗效动物模型，将白细胞介素 10 (IL-10) 和溶瘤腺病毒 Ad-hTERT 联合治疗肺癌，并探索联合治疗的潜在机制。单独接受 AdhTERT 或 IL-10 的 Lewis 肺癌 (LLC) 和 B16F10 荷瘤免疫活性 C57BL/6 小鼠表现出温和的抗肿瘤作用，而联合治疗显着缩小了肿瘤体积并显着延长了生存期。2）为了进一步探索联合治疗介导的抗肿瘤能力的潜在生物标志物，我们在 LLC 和携带 B16F10 的 C57BL/6 小鼠中消除了 CD8+ T、CD4+ T 或自然杀伤 (NK) 细胞，发现 CD8+ T 细胞是联合治疗中的关键介质。3）联合分析溶瘤病毒治疗中免疫细胞的分布特性：增加了 CD8+ T 细胞的肿瘤特异性 IFN-g 分泌。.该研究表明，IL-10 和 Ad-hTERT 联合治疗增强了依赖于 CD8+ T 细胞的抗肿瘤功效。 我们的研究结果为结合细胞因子和溶瘤病毒以增强抗肿瘤免疫疗法提供理论依据。