GARP通过促进Treg细胞分化及生物学功能改善心肌梗死后心室重塑

The persistent and excessive inflammation respond mediated by immunocyte plays an important role in the pathophysiological processes of ventricular remodeling after myocardial infarction (MI). Recent research indicates that Treg negatively regulates the development of ventricular remodeling after MI by its biological functions. The glycoprotein-A repetitions predoMInant (GARP or LRRC32) receptor was identified on the surface of activated Treg. Our previous study found that the expression of GARP enhance the differentiation and biological functions, but its effect on ventricular remodeling after MI has not been reported at present. The study will establish by GARP transgenic MIc、GARP-/- MIce and GARP lentivirus, a dynaMIc observe the cardiac function and ventricular remodeling after MI. Finally, we explore the potential mechanism from molecular 、cellular and animal levels by Flow cytometer、Western Blot、Real Time-PCR、immunohistocheMIstry and Laser Scanning confocal MIcroscope. By the study, we will further improve the inflammatory immune theory on ventricular remodeling after MI and provide new insight for the prevention and treatment of ventricular remodeling after MI.

免疫细胞介导的持续过度炎症反应在心肌梗死(MI)后心室重塑病理生理过程中发挥着重要作用。而Treg细胞被证实通过抗炎、调节炎症细胞表型转化、抑制心肌细胞凋亡等生物学功能可负向调控MI后心室重塑进程。GARP是最新鉴定存在于活化Treg细胞表面的一种跨膜蛋白。我们前期研究发现GARP的表达有益于增强Treg的分化和生物学功能，但其对MI后心室重塑的影响目前尚未见有文献报道。本研究拟利用GARP转基因小鼠、GARP-/-小鼠以及GARP慢病毒构建MI模型，并动态观察MI后小鼠心脏功能和结构变化，同时结合体外实验通过细胞流式、Western Blot、Real Time-PCR、免疫组化等多种技术，从分子、细胞和动物水平探讨GARP表达对MI后心室重塑的影响及作用机制。通过本研究将进一步完善MI后心室重塑的免疫炎症理论，为MI后心室重塑的防治提供新的思路。

由于严重不可逆心脏毒性，阿霉素(Dox)的临床应用受到限制，但导致这种病理反应的确切机制尚不清楚。C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白1(CTRP1)是C1q家族的保守蛋白，在代谢和心血管功能方面发挥着重要作用。然而，CTRP1是否能减轻Dox诱导的心脏损伤仍不清楚。我们的研究旨在调查CTRP1是否对Dox诱导的心脏毒性有影响，并探索这种影响的机制。在我们的研究中，使用体内基因导入技术控制心脏中CTRP1的表达。基因导入后两周，小鼠接受单次腹腔注射Dox (20 mg/kg)以诱导心脏损伤。通过实验我们发现:DOX处理的小鼠心脏CTRP1蛋白水平降低。CTRP1过表达降低了阿霉素处理过小鼠的血浆心肌肌钙蛋白I水平，恢复了心脏功能并减弱了心肌细胞凋亡。在体外实验中，CTRP1还提高了心肌细胞活力，减少了乳酸脱氢酶的释放。Dox导致蛋白激酶B (PKB/AKT)磷酸化水平降低，然而这种改变可通过CTRP1过表达得以恢复。同时，在体外研究中我们发现AKT抑制抵消了CTRP1对心肌细胞凋亡的保护作用。在AKT缺乏的小鼠中，CTRP1失去了对Dox诱导的心脏损伤的保护作用。此外，输注重组CTRP1蛋白可以逆转由Dox治疗引起的预先建立的心脏损伤。总之，CTRP1通过激活AKT来改善受阿霉素诱导的心脏毒性。CTRP1具有治疗Dox诱导的心脏毒性的潜力。