弓形虫作用于猫肠上皮细胞关键粘附蛋白的分离和鉴定

弓形虫病是严重的人兽共患病，弓形虫粘附于宿主细胞是虫体侵入的关键步骤，其侵入宿主细胞的过程及涉及的关键蛋白（分子）是疫苗研制及药物开发的基础。以往研究重点放在了弓形虫感染的人、羊、猪、牛等中间宿主上，但忽略了猫科动物是弓形虫生活史中的唯一终末宿主这一客观事实，因此鉴定弓形虫作用于猫肠上皮细胞的关键粘附蛋白是研究猫作为终末宿主的关键环节。本研究在成功构建弓形虫噬菌体展示文库及建立猫小肠上皮细胞体外原代培养方法的基础上，①用猫小肠上皮细胞对文库进行筛选；②运用生物信息学方法结合弓形虫基因组数据库获得弓形虫作用于猫肠上皮细胞的关键粘附蛋白基因；③用分子生物学方法对粘附蛋白基因进行克隆和原核表达；④蛋白定位；⑤体外验证粘附蛋白与猫上皮细胞的相互作用。