与梨孢菌致病适应性变异相关的功能基因克隆和分析

本项目通过狗尾草和牛筋草梨孢菌菌株SV9619和EI9603的继代接种和单孢分离，并结合致病性测定，建立梨孢菌致病适应性变异的近等基因系蛋白组学和cDNA分析平台，利用双向凝胶电泳和质谱方法分析研究梨孢菌蛋白组学，并构建与致病适应性变异相关的cDNA 3'端序列标签（ESTs）文库，根据功能蛋白的氨基酸序列，设计简并引物从相应的cDNA文库中进行PCR扩增，PCR扩增产物直接作为探针或根据扩增产物的DNA序列合成探针与相应ESTs 文库的cDNA基因芯片杂交，钓取与致病适应性变异相关的功能基因；进而采用knock out和酵母双杂交分析系统研究基因性质和生物学作用。该研究是目前稻瘟病菌分子生物学研究领域一次重要探索，在揭示梨孢菌致病性适应性变异的分子生物学机制的同时，也为明确稻区杂草寄主上的梨孢菌与稻瘟病的发生关系，提供重要的分子生物学依据。