“温阳补气”针法对EAMG大鼠神经-肌肉接头处AchR时空表达的动态调节研究

重症肌无力(MG)是主要累及神经-肌肉接头处突触后膜上乙酰胆碱受体(AchR)的自身免疫性疾病，病理关键之一在于神经-肌肉接头处AchR数量变化、空间分布异常，实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)是目前国际公认的MG动物模型。本项目在针灸防治EAMG免疫学机制研究（教育部新世纪优秀人才支持计划）取得阶段性成果基础上，联合应用RT-PCR和激光共聚焦显微镜（CLSM）检测技术，针对病理关键，开展"温阳补气"针法对EAMG大鼠神经-肌肉接头处AchR时空表达的动态调节研究，通过神经-肌肉接头处的AchR总RNA表达、三维重构、定量分析、实时成像、活细胞跟踪等方面的动态变化，探讨"温阳补气"针法对AchR异常表达的调节作用，明确作用靶点，深入揭示"温阳补气"针法防治EAMG的效应机制，为MG的针灸防治、临床诊断、疗效判定提供新的实验指标与依据，从而更好地指导和促进针灸治疗MG的临床研究。

重症肌无力（MG）是一种以部分或全身骨骼肌无力和极易疲劳为主要临床表现的自身免疫性疾病，具有治疗难度高、易反复发作等特点。流行病学研究发现，全球MG的总体发病率呈逐渐上升趋势，并且儿童MG的发病率明显升高，严重危害患者的身体健康和生活质量。.现代医学治疗MG能有效缓解患者临床症状，但是普遍存在副作用大、远期疗效欠佳的问题。中医学认为MG属于“痿证”的范畴，项目组通过大量的研究发现，当前的MG患者以虚证居多，其病因多由起居失常、劳逸失衡、饮食不节和七情内伤所致，其病位主要在脾肾二脏，其病机主要为脾胃虚弱致气血化生乏源，或肾阳不足至精血亏虚，以致筋肉失于濡养，久之导致机体颓痿无力。针对MG患者脾气虚弱，肾阳不足的主要病机，项目组创新提出了“温阳补气”基本治则，采用“温阳补气”针法随证加减治疗MG，旨在温阳补髓、益气养血、濡润宗筋，以补气助力、壮肌治痿。.为阐释“温阳补气”针法治疗MG作用机制，本研究采用AChRα1 129-145多肽片段免疫接种雌性Lewis大鼠，建立EAMG大鼠动物模型，通过观察“温阳补气”针法对 EAMG 大鼠体重，Lennon症状评分，血清IL-12、IL-18、 IgG、IgM、TGF-β、TNF-α表达水平，以及对EAMG大鼠神经肌肉-接头处AchR表达分布的影响，分析“温阳补气”针法对EAMG的治疗效果及其作用机制。研究结果证实，“温阳补气”针法具有降低EAMG大鼠血清中IL-12、IL-18、IgG、TNF-α表达水平，提高EAMG大鼠血清中TGF-β表达水平的作用，结合项目组前期研究结果证实，“温阳补气”针法通过调节上述细胞因子的表达，并进一步抑制了IFN-γ和AChR-Ab的表达，从而发挥了治疗MG的作用。项目组还通过激光共聚焦和RT-PCR研究证实，“温阳补气”针法对EAMG大鼠神经-肌肉接头处AchR的数量和分布均具有良好的调整作用，其作用效果与溴吡斯的明治疗药物相近。.通过本项目的研究，初步揭示了“温阳补气”针法治疗MG的免疫学机制和作用靶点，充分证明“温阳补气”针法对MG具有良好的治疗作用。本项目的研究结果，为临床采用针灸疗法治疗MG，提供了可靠的、高质量的实验依据，充分证明针灸疗法可以作为MG的主要治疗手段，用于MG患者的临床治疗，有助于切实提高MG的临床治疗水平，提高MG患者的生活质量，并能创造良好的经济效益和社会效益。