全长庚肝病毒基因一次性RT-PCR克隆及转基因鼠模型研究

庚型肝炎病毒（HGV）是1995年新发现的一类与人类肝炎相关的RNA病毒，其嗜肝性和致病性等问题一直悬而未决。本课题在国家自然科学基金的资助下，于1998年首次成功地克隆出一个包括HGV基因组5′端和3′端的完整序列，获得了国家专利，并在GenBank注册（AF081782）。利用该完整克隆进行了建立转基因模型的研究，采用受精卵原核显微注射的方法产生了含HGV次全长基因的转基因小鼠，得到了整合有外源基因的F1代阳性小鼠。RT-PCR结果显示，HGV基因中在转基因小鼠血液有核细胞及肝细胞内转录；组织病理及免疫组化与原位杂交显示转基因小鼠肝细胞出现水样变、脂肪变性及轻度炎性反应；HGVE2抗原可在肝细胞表达；HGV基因组可在血液及肝细胞内检出。