麻疹病毒不同结构蛋白特异性IgA抗体间的抗病毒协同效应

The mucosal immune system provides the initial immunological barrier against most pathogens which invade organism through mucosal system, and secretory IgA antibodies mediate primary defense functions in mucosal immune system. We have demonstrated that measles virus matrix protein specific IgA antibody can interact with newly synthesized matrix protein during IgA transport through the epithelial cells, and neutralize virus replication intracellularly, implying that besides surface proteins which were traditionally regarded as targets antigens, highly conserved non-surface proteins can also be effective anti-viral target antigens. M protein plays an important role in the assembly process of the measles virus, studies have pointed out that the M protein was able to interact with RNP which was comprised of RNA genome and the N, P, L proteins, and associate with the rafts together. M protein also interact with other structural proteins involved in virus assembly. Our results show that there may be synergistic effect between the M protein and N protein specific IgA antibodies(unpublished data). This study will further explore whether synergistic effect exist or not between 4 major measles virus structural proteins'（M， N， H， F） specific antibodies, and explain the molecular mechanism of how IgA inhibit virus replication and synergistic effect exist. According to these theories, we can advance an optimized immunization scheme for measles recombinant polypeptide mucosal vaccine, and give some academic support for the mucosal vaccines design of measles virus mutant and other virosis.

粘膜系统是许多病原体侵入人体的途径，也是机体免疫的第一道屏障，而分泌型IgA抗体在粘膜免疫中起主要作用。我们已证实麻疹病毒非表面蛋白M特异性IgA抗体能够在跨粘膜上皮细胞转运过程中，与病毒新合成的游离M蛋白发生细胞内中和，并抑制病毒复制，这说明除传统上作为免疫靶标的表面蛋白外，保守性较强的非表面蛋白也能成为抗病毒免疫靶标。M蛋白在麻疹病毒组装过程中起重要作用，有研究指出M蛋白能够引导N蛋白的定位，并与其它结构蛋白相互作用从而影响病毒组装，而我们的实验结果显示M蛋白与N蛋白特异性IgA抗体间可能存在抗病毒协同效应（未发表数据）。本研究将进一步探索四种麻疹病毒主要结构蛋白M、N、H、F特异性IgA抗体间的协同效应，并分析抗体转运对病毒蛋白在细胞内时空分布和含量的影响，阐明抗体影响病毒结构蛋白生物学功能的具体方式和协同效应产生的分子机制，为针对麻疹突变株乃至其他病毒病的粘膜疫苗设计提供理论支持。

粘膜系统是许多病原体侵入人体的途径，也是机体免疫的第一道屏障，而分泌型IgA抗体在粘膜免疫中起主要作用。在之前的工作中,我们已证实麻疹病毒非表面蛋白M特异性IgA抗体能够在跨粘膜上皮细胞转运过程中，与病毒新合成的游离M蛋白发生细胞内中和，并抑制病毒复制，这说明除传统上作为免疫靶标的表面蛋白外，保守性较强的非表面蛋白也能成为抗病毒免疫靶标。M蛋白在麻疹病毒组装过程中起重要作用，有研究指出M蛋白能够引导N蛋白的定位，并与其它结构蛋白相互作用从而影响病毒组装，其特异性抗体与麻疹病毒其它蛋白特异性抗体联用时很可能出现协同效应。基于以上理论基础，本研究检测了三种麻疹病毒主要结构蛋白M、N、H特异性IgA抗体间的协同效应，结果显示N蛋白特异性抗体与H蛋白及M蛋白特异性抗体间均存在显著的抗病毒协同效应，而M蛋白与H蛋白特异性抗体间则表现为加和效应。这一结果提示在麻疹疫苗的设计中，N蛋白可能是更重要和核心的免疫靶标，为针对麻疹突变株乃至其他病毒病的粘膜疫苗设计提供了理论参考。本研究进一步利用荧光定量分析技术测定了当M蛋白和N蛋白特异性IgA抗体分别及同时跨膜转运时，对M蛋白和N蛋白在细胞内游离蛋白和总蛋白含量的影响，结果显示单独使用这两种蛋白特异性IgA抗体中的任何一种，均能显著提高细胞内游离M蛋白和N蛋白含量，提示抗体抑制病毒复制的机制可能是通过结合病毒组装过程中的关键蛋白从而阻止病毒组装和释放，同时造成大量无法组装的病毒游离蛋白堆积在细胞膜下。本研究初步阐明了IgA抗体通过影响病毒内在蛋白生物学功能从而抑制病毒复制的机制，并为以病毒内在蛋白为靶标的疫苗设计提供了理论支持，相关结果已在整理投稿中。