糖原合成酶激酶3β在小鼠骨髓树突状细胞免疫耐受诱导中的作用机制研究

我们已经证明小鼠骨髓树突状细胞（DC）诱导T细胞免疫耐受的功能与其成熟状态有关。在影响树突状细胞成熟的因素中，以核因子RelB最为重要，那么RelB的表达受何分子的调控呢？有研究发现糖原合成酶激酶3β是调节核因子RelB表达的关键信号分子，因此本研究拟采用基因沉默和转基因方法，进行糖原合成酶激酶3β抑制和增强表达研究，探讨其对树突状细胞表达核因子RelB的影响，并研究DC表面共刺激分子以及MHC-II类分子的表达，以及刺激Th细胞因子的分泌，IL-12和CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的产生，证实其对小鼠骨髓树突状细胞免疫耐受诱导的作用。为进一步探讨其在自身免疫病小鼠模型中的作用，本研究将基因修饰的DC输入胶原诱导性关节炎（类风湿关节炎经典动物模型）小鼠体内，并研究其细胞及体液免疫功能，旨在探讨糖原合成酶激酶3β在自身免疫病治疗中的可能，为自身免疫病药物开发提供新的靶点。

糖原合成酶激酶GSK-3β对核转录因子NF-κB/RelB起重要的免疫调节作用。本研究通过对目标基因GSK-3β的过表达和弱表达对骨髓树突状细胞的免疫功能进行研究，发现过表达GSK-3β后，骨髓树突状细胞DC2.4中RelB的表达会增强；而过表达RelB的DC2.4中GSK-3β的表达也增高。而在DC2.4细胞和空病毒对照组中GSK-3β和RelB均呈低水平表达。对GSK-3β进行基因沉默后，发现其对骨髓树突状细胞RelB的表达有影响，这种影响似乎并不显著，时有时无，因此还不能明确其对RelB的作用机制。有关对骨髓树突状细胞表面分子的表达影响方面发现用GSK-3β抑制剂或者基因沉默GSK-3β后骨髓树突状细胞特征性表达分子CD11c 会消失，其余MHC-II类分子，CD86和CD40等分子的表达也呈现不同的变化，这些还在进一步证实中。体内动物实验部分因为各种原因还未曾做到。载体构建部分发表论文一篇，后续实验结果待整理中。