CD44单抗对骨髓间充质干细胞所诱导的AML细胞化疗耐药性的抵抗作用

急性髓细胞白血病（AML）缓解后患者体内残留的白血病干细胞（LSC）是白血病复发根源。骨髓造血微环境为LSC阻滞于G0期及耐药产生提供信号支持，因此阻断维系LSC和微环境间的关联纽带有可能清除LSC。粘附分子CD44介导造血细胞与微环境间的信号转导。据报道及前期研究发现在体外骨髓间充质干细胞（MSC）可诱导粘附在其表面的AML细胞获得LSC样特性,伴随CD44v表达明显上调。本项目采用AML细胞与正常骨髓MSC共培养所形成的鹅卵石样结构模拟体内的AML-LSC及骨髓微环境；一方面研究MSC对AML细胞化疗耐药性的诱导作用及CD44单抗A3D8对该作用的抵抗效应；另一方面从差异表达基因的筛选到相关信号通路的分析等不同层面深入研究A3D8干扰MSC对AML细胞作用的机制，旨在揭示A3D8抵抗MSC所诱导的化疗耐药性的内在机制，为探索以细胞表面粘附分子为靶标的AML治疗药物的研制奠定理论基础。

抗CD44单抗(mAb) A3D8在体外通过上调p27Kip1诱导急性髓细胞白血病AML的分化或凋亡。骨髓微环境中的基质细胞在AML细胞发生耐药的过程中发挥至关重要的作用。为了探讨骨髓基质细胞的粘附对AML细胞发生A3D8耐受的效应，我们建立了急性早幼粒细胞白血病NB4细胞株与人骨髓基质HS-5细胞或与骨髓间充质干细胞MSC的共培养体系。结果发现NB4细胞粘附于HS-5细胞或MSC后会产生对A3D8的耐药，而且该过程是由于PI3K/Akt信号通路的活化、p27Kip1的下调与胞浆的重新分布造成的。而且，与基质细胞共培养所诱导的耐药作用可以被PI3K/Akt信号通路的特异性抑制剂部分逆转。在研究其他两种AML细胞株（THP-1细胞与HL-60细胞）及原代AML细胞时也有同样的发现。我们的研究结果表明与骨髓基质细胞共培养所诱导的AML细胞对A3D8的耐药与部分是通过PI3K/Akt–p27Kip1轴，阻断PI3K/Akt信号通路可能是提高抗CD44单抗治疗骨髓微环境中的AML细胞的效果所必需的。