利用3C研究肿瘤转移抑制基因p66Shc在小细胞肺癌细胞中失活的分子机制

肿瘤细胞逃逸失巢凋亡是肿瘤细胞实现转移的基础之一，SHC A家族成员p66Shc是诱发正常细胞失巢凋亡的主要蛋白，我们发现在转移程度高的小细胞肺癌细胞中它的表达缺失，而将p66Shc重新导入肺癌细胞会抑制肿瘤的转移，因此p66Shc在小细胞肺癌细胞中表达的缺失与小细胞肺癌的转移密切相关，本项目将在原工作基础上进一步探讨p66Shc基因的表达调控，利用3C技术研究正常人支气管表皮细胞以及小细胞肺癌细胞中p66Shc基因的染色体构象，根据其构象的变化寻找与该基因激活和关闭相关的顺式调控序列并进一步研究其功能，同时结合染色体免疫沉淀，DNA FISH等技术探讨p66Shc基因组蛋白修饰的变化及其与异染色体之间相对位置的变化，以了解p66Shc基因在小细胞肺癌细胞中失活的分子机制，以期寻找能够特异性重新激活p66Shc基因在小细胞肺癌细胞中表达的方法，为小细胞肺癌的治疗提供新的靶点。

SHCA家族成员p66Shc是诱发正常细胞失巢凋亡的主要蛋白，该蛋白在肺癌细胞中表达缺失且其缺失是肺癌细胞逃脱失巢凋亡发生转移的关键因素，本项目利用3C技术细致研究了p66Shc基因在肺癌细胞中失活的分子机制以及p66Shc缺失影响肺癌转移的进一步机理，发现p66Shc启动子上游的增强子与启动子直接相互作用是p66Shc基因转录的必要条件，而正常情况下仅表达于淋巴细胞的转录因子Aiolos在肺癌细胞中异位表达，并通过结合p66Shc基因的增强子阻止增强子与启动子共定位，从而抑制p66Shc基因转录，这一发现将淋巴细胞调控网络与实体肿瘤转移联系起来，为实体肿瘤转移机制提出了新的思路。此外发现p66Shc与NRF2之间存在负反馈环路，p66Shc蛋白的缺失不仅促进肺癌细胞逃脱失巢凋亡发生转移，同时可通过上调NRF2降低肺癌细胞对化疗药物的敏感性，提示重新激活p66Shc在肿瘤细胞中的表达很可能是肿瘤治疗中更为有效的治疗方案。