胆囊癌长链非编码RNA的功能及相关分子机制研究

申请者在前期工作中，利用ArrayStar的lncRNA芯片技术筛查了胆囊癌超过19000条的lncRNA，证实了其中28条lncRNA在胆囊癌组织中特异性高表达，推测它们可能在胆囊癌的发病过程中发挥潜在的调节功能。本项目拟通过胆囊癌细胞和动物模型，分析差异表达的候选lncRNA分子的功能及调控机制，并收集大量临床病例样本进行验证，探讨lncRNA在胆囊癌发生中的扮演的角色，从而为临床开发研制基于非编码RNA的诊断和治疗药剂奠定理论基础。

胆囊癌是一种侵袭性很强的恶性肿瘤，预后较差。长链非编码RNA在胆囊癌发生发展中所扮演的角色至今仍不清楚。我们的研究通过验证lncRNA的差异表达，筛选出3条与胆囊癌病理特征与预后具有显著相关性的长链非编码RNA。然后制备lncRNA过表达和敲减的慢病毒载体，实现lncRNA的上调和下调，在细胞水平对其功能进行了研究。最后，利用Real-time PCR 和Western blot方法验证下游靶基因在mRNA和蛋白水平受lncRNA调控的情况，探讨其分子机制。结果表明，linc-KIAA0125、linc-TPTE2P1、linc-ITGB1等3条lncRNA与胆囊癌的进展过程明显相关，沉默这些lncRNA可明显抑制胆囊癌细胞的迁移能力和侵袭能力。其可能的分子机制在于lncRNA能调控EMT相关蛋白如β-catenin、vimentin等的表达。这为胆囊癌的潜在治疗方案提供了理论基础。