甲基苯丙胺依赖鼠相关脑区NGF、BDNF、NT3、NT4的表达及天麻素的保护作用研究

本课题拟建立甲基苯丙胺慢性依赖大鼠模型，采用原位杂交、蛋白质免疫印迹、RT-PCR等技术，对动物模型中脑边缘系统六个脑区（伏隔核、中脑腹侧被盖区、黑质、前额叶皮层、海马、纹状体）的神经营养因子家族NGF、BDNF、NT3、NT4及其受体的变化进行检测，深入探讨甲基苯丙胺所致神经毒性损害和依赖性机制。给予天麻素干预后观察上述相关脑区NGF、BDNF、NT3、NT4及其受体的变化，评价天麻素干预对甲基苯丙胺依赖鼠相关脑区神经营养因子代谢变化的作用并探讨其机制。分析神经营养因子家族及其受体与甲基苯丙胺依赖性机制的关系，评价天麻素对甲基苯丙胺依赖鼠相关脑区神经营养因子家族代谢变化的影响，探讨天麻素对甲基苯丙胺滥用所致神经损伤的作用。进一步阐明甲基苯丙胺所致神经毒理损害和依赖性机制。

本研究通过建立甲基苯丙胺（MA）慢性依赖大鼠模型，对中脑边缘系统六个脑区神经营养因子家族中的神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）、神经营养因子3（NT3）、神经营养因子4（NT4）及其受体酪氨酸激酶受体A（TrkA）、酪氨酸激酶受体B（TrkB）、酪氨酸激酶受体C（TrkC）和p75NTR的表达变化进行研究。选择云南特有药物－天麻素进行干预，观察干预后上述脑区神经营养因子及其受体的表达变化，评价天麻素对甲基苯丙胺滥用所致神经损伤的作用。.实验重要结果：（1）实验大鼠注射MA后出现明显行为学变化，条件性位置偏爱效应明显，刻板行为评分明显增加。（2）MA依赖大鼠四种神经营养因子的表达：在MA依赖组六个脑区NGF、BDNF和NT3的表达总体呈现下降趋势，随着依赖时间延长，表现为逐渐回升趋势；NT4的表达，除纹状体和黑质两个脑区外，其余四个脑区从一周到八周为下降趋势，随着依赖时间的延长有逐渐回升趋势。（3）MA依赖大鼠神经营养因子受体的表达：受体TrkA在除额叶、海马外的四个脑区为一周组表达下降，随后逐渐回升。TrkB在额叶皮质、中脑腹侧被盖和黑质三个脑区为先升高再下降的趋势；在其余三个脑区则总体呈现下降趋势。p75NTR，在额叶皮质、纹状体和黑质三个脑区为一周组下降，随后逐渐回升；在其余三个脑区则为依赖一周组表达升高，从二周到八周时先下降再逐渐回升。TrkC在除叶皮质和海马外的四个脑区总体呈现一周组表达下降，四周到八周时为逐渐回升趋势。（4）给予天麻素干预后，大鼠行为学与单纯MA依赖有明显变化，条件性位置偏爱效应减弱，刻板行为评分减少。（5）MA依赖大鼠给予天麻素干预后，四种神经营养因子及其受体的表达与单纯MA依赖组比较有差异。.本研究发现，MA依赖大鼠中枢神经系统中四种营养因子及其受体表达有明显变化，提示MA依赖机制与神经营养因子家族及其受体的表达有密切关系。给予天麻素干预治疗后，发现不同时段组大鼠的行为学变化及相关脑区神经营养因子及其受体表达均较单纯MA依赖组有较显著改善。研究结果提示天麻素具有治疗MA依赖的潜力。需要进一步从细胞机制和分子机制深入研究。.依托课题研究，目前已发表论著1篇，综述2篇。项目组获得国家自然科学基金资助一项，云南省科技厅－昆明医科大学联合专项重点项目、面上项目各一项。