以肺俞穴调制肺免疫炎症探讨穴位体表脏腑相关的神经免疫内分泌机制

The acupoint-viscera mechanisms is unresolved key issues in acupuncture theory，which its research focus on neuroimmunoendocrine mechanism. The subject will explore the neuroimmunoendocrine scientific connotation of acupoint-viscera mechanisms by Feishu modulating pulmonary immune inflammation.This study proposes, by rat lung immune inflammation model, using many methods, analyse Ach receptor M2, M3, M1 mAchR, Ach and NA in lung, histological changes, lung function changes, to explore parasympathetic and sympathetic mechanism of Feishu to lung acupoint-viscera; Investigate Ach, TNF-α, IL-1, IL-6 and IL-18 changes and correlation in bronchoalveolar lavage fluid, peripheral blood and lung tissue; analyse IFN-r, IL-4 and related factors changes in peripheral blood, Feishu adjusting Th1/Th2 imbalance, IL-1β, IL-6, TNF-α level changes in the T3 spinal ganglion, to explore the nervous and immune contact mechanism of acupoint-viscera; Analyse ACTH and peripheral cytokine in peripheral blood, to explore acupuncture through real-time neural reflex interfere with endocrine changes in pulmonary anti-inflammatory mechanism. The subject will provide a theoretical basis for resolving key issues in the acupuncture mechanism.

穴位体表脏腑相关机理是针灸理论尚未解决的关键问题，神经免疫内分泌机制是其研究的热点。本课题在前期研究肺免疫炎症的神经生物学机制和针灸机理的基础上，以针刺肺俞穴调制肺免疫炎症为媒介，系统探索穴位体表脏腑相关的神经免疫内分泌科学内涵。经鼠肺免疫炎症模型；用多种方法，分析肺组织Ach受体M1 、M2、M3 mAchR、及Ach、NA、组织学、肺功能等变化，探讨针刺肺俞穴与肺体表脏腑效应的副交感和交感神经联系机制；分析肺泡灌洗液、外周血、肺组织Ach和TNF-α、IL-1、IL-6和IL-18的变化和相关性，外周血相关因子的变化分析针刺肺俞穴对Th1／Th2失衡的校正，肺组织、T3脊神经节IL-1β、IL-6、TNF-α水平的变化，探讨穴位体表脏腑相关的神经与免疫联系机理；分析外周血ACTH及相应外周细胞因子，探讨针刺通过神经反射实时干预内分泌变化参与肺免疫炎症。为穴位体表脏腑相关机理提供理论依据

.目的：穴位体表脏腑相关是针刺治疗疾病的基本原则，然而其具体机制尚不明确，本实验以“肺俞”穴调制肺免疫炎症为媒介探讨副交感神经在“肺俞”穴与肺脏之间穴位体表脏腑相关特异性的作用，以及神经介导的免疫因素和内分泌因子在其中的作用。方法：采用HE染色方法观察肺组织形态，支气管灌洗液细胞总数及分类细胞计数评价模型，免疫荧光、Real-time PCR、Western blot对副交感神经神经递质受体M1、M2、M3和Ach的水解酶AchE和合成酶ChAT的蛋白含量和mRNA水平进行检测，ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-18的含量。结果：M1受体在肺免疫炎症、针刺“肺俞”穴干预和非经非穴针刺干预中均升高， “肺俞穴”干预与非经非穴比较能够上调M2受体水平；针刺“肺俞”穴干预和非经非穴针刺干预中M3受体均下调，而非经非穴组M3 mRNA下降水平明显高于“肺俞”穴组。针刺“肺俞”穴能够降低AchE和 ChAT高水平表达，并且与非经非穴有差别。本实验中针刺“肺俞”穴均下调肺免疫炎症中升高的TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-18的含量，并与非经非穴组形成显著差别，证明针刺特定穴位“肺俞”穴能够对相应肺脏通过神经免疫调节其病理变化。结论：①针刺“肺俞”穴对肺部炎症所导致的致热物质的释放有稀释或者抑制作用，发挥“散发肺脏之热”功效。②针刺“肺俞”穴降低肺免疫炎症中气道高阻力表现的“喘与哮”。③针刺“肺俞”穴关系着肺免疫炎症的防治和预后，为中医在穴位贴敷预防呼吸道感染疾病提供佐证。④为中医理论肺俞穴主治：咳嗽，气喘，吐血，骨蒸，潮热，盗汗，鼻塞等肺经及呼吸道疾病提供有力的证据。⑤穴位脏腑相关经由特定穴位通过副交感神经介导相应脏腑的病理变化。针刺特定穴位“肺俞”穴能够对相应肺脏通过神经免疫调节其病理变化。⑥从实验角度上证明针刺“肺俞”对相应肺脏调节是多靶点的。 ⑦中医临床提出“穴无定处”。本实验证明非经非穴还是在不同程度上影响脏腑的病理变化，个别作用甚至优于经典穴位，但是总体调节病理改变还是经典穴位“肺俞”明显优于非经非穴。