华支睾吸虫ESP对乙肝病毒复制的影响及分子机制研究

Clonorchiasis and Hepatitis B virus (HBV) infection are two major public health issues that are widely popular in our province and China. We know that co-infection of Clonorchis sinensis (C.sinensis) and HBV is common, however, there is few data currently to show the relation between HBV and C.sinensis infection. Our data shows that co-infection of C.sinensis and HBV will weaken the effection of anti-virus. Does the C.sinensis stimulate the replication of HBV? If yes, what is the mechanism? We found that the excretory-secretory products (ESP) could stimulate the replication of HBV in cell model. So, we suppose that the ESP active directly the liver-enriched transcription factors and facilitate HBV X protein enter into the nuclear, stimulating the replication of HBV. Our study, using co-immunoprecipitation、siRNA and laser scanning confocal, aims to discover the mechanism of replication of HBV stimulated by ESP, state the importance of C.sinensis treatment for HBV infected patients, guild the clinical doctors choose the right treatment plans, and to provide a new target for developing medicine.

华支睾吸虫病和乙型肝炎是广泛流行我国、我省的两种疾病，合并感染病例常见，然而两者的相互作用机制尚未阐明。我们的临床数据已证明合并感染华支睾吸虫减弱了抗病毒的治疗效果。那么华支睾吸虫是否促进乙肝病毒的复制？其分子机制是什么？我们在细胞模型中已发现其排泄分泌抗原（ESP）可促进乙肝病毒的复制，我们提出假设ESP可激活肝富集转录因子，同时可促进HBV X蛋白的入核，从而促进HBV的复制。本项目拟采用免疫共沉淀、siRNA和激光共聚焦等方法，旨在验证我们提出的假设，从而揭示ESP促进乙肝病毒复制的分子机制，阐明合并感染患者防治华支睾吸虫的重要性，指导临床用药及选择正确的治疗方案来防控和治疗疾病，也可为药物研发提供新的靶点。

一、.项目背景.华支睾吸虫病目前已经成为我国流行最广、危害最大的食源性寄生虫病。乙型肝炎病毒(HBV)感染是一个世界性的医疗健康难题，其已经成为严重威胁人类健康的重要的公共卫生问题。基于这两种病在广东地区的合并感染病例常见，在此基础上我们进一步研究合并华支睾吸虫感染对乙肝病毒复制的影响及分子机制研究，旨在阐明合并感染患者防治华支睾吸虫的重要性，以指导临床用药及选择正确的治疗方案来防控和治疗疾病，为阐明合并感染华支睾吸虫致肝硬化，甚至肝癌的机制奠定基础，更可为其防治提供新的药物靶点。.二、.主要研究内容.1. 合并感染华支睾吸虫对乙型肝炎患者肝纤维化发展的影响，从体内和体外分别验证。.2. 体外合并感染药物治疗模型的建立和研究，为进一步免疫机制的研究奠定理论基础。.3分析合并感染华支睾吸虫对男性慢性乙型肝炎患者性激素水平的影响。探讨合并感染与性激素之间的相互作用关系。.4. 分析乙型肝炎合并感染华支睾吸虫患者凝血相关指标的变化，为临床诊断和治疗以及预后监测提供参考价值。.三、.重要结果和关键数据以及科学意义.1..我们的临床数据和细胞模型数据表明无论从体内还是体外都证实了华支睾吸虫和HBV的共同感染会加重肝纤维化的进展。CsTP可能促进肝脏的慢性炎症，导致肝纤维化的发展。.2..体外合并感染药物治疗模型的数据表明CsTPs可以削弱ETV的作用。HBeAg和HBV DNA水平之间可能存在分离。CsTPs可能直接影响HepG2.2.15个细胞，但不依赖于免疫应答。.3..分析比较合并感染华支睾吸虫对男性慢性乙型肝炎患者性激素水平的影响结果表明合并感染华支睾吸虫后会进一步加剧乙肝患者的性激素紊乱，无论是疾病是处在慢性肝炎期还是肝硬化期，可用来指导临床用药及选择正确的治疗方案来防控疾病。.4..分析乙型肝炎合并感染华支睾吸虫患者凝血相关指标的变化结果表明合并感染华支睾吸虫会进一步加重乙肝患者的凝血功能障碍，并且慢性乙肝患者随着疾病的进展至肝硬化会加重凝血功能发生障碍，以进一步指导临床用药和监测预后。