基于荧光-磁性智能探针灵敏快速检测肿瘤标志物的多组分免疫分析方法研究

肿瘤标志物临床检测方法存在"不能多组分同时检测、非均相免疫分析需要第二信号探针辅助检测"等不足。本项目针对上述问题拟研制出具有不同磁响应强度和超强荧光检测信号的新型荧光-磁性智能探针，建立基于该探针灵敏、快速检测肿瘤早期诊断标志物的流动式多组分免疫分析方法。借助于量子点和磁纳米粒子首先研制可由磁场梯度操纵的具有不同特定磁响应强度的新型荧光-磁性双功能材料，然后研究具有数量可控性的抗体固定方法以制备可用于多个肿瘤标志物检测的荧光-磁性智能探针，在此基础上设计自动化的流动分析系统，建立基于该探针的流动式多组分免疫分析方法，并研究探针与样本的快速孵育技术和不同靶探针的快速分离技术，为该法用于临床样本分析提供可靠分析参数。通过本研究，可得到快速检测多个肿瘤标志物的智能探针与基于磁场区带分辨的多组分免疫荧光检测方法，将为肿瘤早期诊断标志物组的临床检测等重要领域提供灵敏、快速和简便的新技术与方法。

恶性肿瘤由于其早期发现率太低，目前是严重威胁人类健康和生命安全的重大疾病，因而肿瘤的早期诊断、早期治疗是患者获得长期生存的最主要途径。又由于肿瘤标志物具有特异性强、敏感性高的特点，因而对肿瘤标志物的检测是实现肿瘤早期诊断的重要手段。针对目前肿瘤标志物临床检测方法中存在的不足之处，本项目完成了如下工作：（1）基于荧光量子点和磁性纳米粒子，通过层层组装和共包埋两种方式分别制备了两类不同的稳定好、生物相容性好、可实现外磁场梯度分离和荧光高灵敏度检测的荧光-磁性免疫传感智能探针；（2）以三组不同荧光标记的免疫球蛋白（IgG）为分析模型，在外磁场中基于磁场区带分辨和荧光检测，简单快速地实现了对多个靶蛋白的近同时分离与分析。本研究工作的科学意义在于：（1）不同于以往基于多标记和阵列模式进行多组分同时分析的传统方法，本工作提出并成功实现了磁场区带分辨（即以不同的磁响应性能为区分信号进行多组分的分离）的新分析模式。（2）磁场区带分辨具有简单、方便、快速和高通量的特点，结合常规的荧光检测，有望成为疾病早期诊断的有效技术手段。