花生四烯酸CYP表氧化酶代谢物- - EETs防治2型糖尿病和胰岛素抵抗的作用和作用机制研究

在过去系统研究花生四烯酸细胞色素P450（AA-CYP）表氧化酶代谢物表氧化二十碳三烯酸（EETs）对心血管保护作用基础上，我们初步研究了其对糖尿病及胰岛素抵抗的影响，证明能显著降低2型糖尿病动物血糖和甘油三酯水平、减轻胰岛素抵抗。本项目将在此基础上，采用CYP表氧化酶转基因动物和不同糖尿病模式动物及细胞模型等系统研究内源性小分子化合物EETs降低和调节糖尿病动物血糖水平、改善组织胰岛素抵抗（骨骼肌、肝脏、心肌和肾脏等）和防止胰岛细胞功能衰竭作用和分子机制（包括抗氧化和内质网应激损伤的作用及机制、明确EETs作用的受体和分子靶点）；研究EETs影响脂肪酸代谢、防止糖尿病心肌病、糖尿病肾病作用和作用机制。通过本项目研究阐明内源性抗损伤系统AA-CYP表氧化酶基因-EETs抗糖尿病及胰岛素抵抗的作用和作用机制，为研究新的糖尿病防治策略和药物提供理论依据。

在基金委的资助下，本项目主要完成了以下内容：.1、利用不同的动物模型从两个方面来研究了花生四烯酸CYP表氧化酶代谢物EETs在2型糖尿病防治和改善胰岛素抵抗中的全身效应。.(1) EETs过表达对糖尿病的影响.(2) 在糖尿病鼠中过表达EETs对其发生和发展的影响.2、CYP表氧化酶代谢物EETs在改善周围器官组织胰岛素抵抗中的作用。.（1）CYP表氧化酶-EETs对肝脏及肝细胞葡萄糖和脂代谢影响.（2）CYP表氧化酶代谢物EETs对骨骼肌胰岛素抵抗和糖脂代谢的影响.（3）CYP表氧化酶代谢物EETs对心脏及心肌细胞胰岛素抵抗和糖脂代谢的影响.（4）CYP表氧化酶代谢物EETs对抗糖尿病肾病的作用.3、CYP表氧化酶代谢物EETs在胰岛细胞抗损伤和胰岛细胞增殖、存活和凋亡及其胰岛素分泌功能中的作用.（1）在上述的CYP表氧化酶基因转染或转基因+糖尿病模式动物中通过组织学研究观察胰岛增生肥大、胰岛细胞凋亡、胰岛纤维化改变，以了解CYP表氧化酶代谢物EETs的预防作用.（2） 按照已经建立的方法分离培养上述动物的胰岛，在培养状态下研究内源性和外源性EETs刺激对诱导胰岛素分泌的作用，同时研究其信号转导通路及相关机制.（3） 在培养的胰岛细胞系和原代分离培养的胰岛细胞分别给予转染CYP表氧化酶基因和外源性 EETs，观察其对细胞增殖、抗凋亡和促进胰岛素分泌的作用；用不同的信号分子及核受体阻断剂等研究其作用机制.（4） 在胰岛培养和胰岛细胞系培养中研究CYP表氧化酶代谢物EETs对抗胰岛素抵抗的作用：包括对葡萄糖刺激反应性、对胰岛素前体合成的影响.4、CYP表氧化酶代谢物EETs抗糖尿病和改善胰岛素抵抗作用的分子和受体机制研究.（1）胰岛素受体及其下游信号系统.（2）蛋白激酶C和MAPK信号系统.（3）传统细胞凋亡信号系统.（4）以PPARs为代表的代谢性核受体.（5）内质网应激通路和氧化应激机制.项目内容实施顺利，取得了突破性的研究结果，已发表标记资助并见刊SCI论文18篇，分别发表于Adv Drug Deliv Rev (IF: 12.888)，Diabetes (IF: 7.895)和Endocrinology (IF: 4.717)等国际权威期刊上