HBV特异性免疫效应细胞预防肝移植术后乙肝复发的研究

乙肝肝移植术后，由于病肝被切除，此时体内病毒负荷相对较低，通过输注针对乙肝病毒特异性免疫效应细胞，重建患者针对乙肝病毒的主动免疫，从而清除残存的病毒颗粒，并最终实现停用乙肝免疫球蛋白及抗病毒药物治疗。因此，我们设想：通过动物体内外实验观察免疫效应细胞抗乙肝病毒的作用并深入探讨其机制，在动物实验的基础上开展临床研究，研究肝移植术后免疫效应细胞预防乙肝复发的作用及机制，于术后不同时间点检测受体乙肝相关标记物变化及移植肝及外周血cccDNA、HBV DNA的变化，检测移植肝病理改变及移植肝及外周血淋巴细胞比例和相关细胞因子的变化，最终实现彻底清除移植术后患者体内残存的乙肝病毒，也就意味乙肝终末期肝病患者肝移植术后达到乙肝彻底治愈的目标。从而建立新的乙肝肝移植术后预防乙肝病毒复发的方法。

乙肝患者如果肝移植术后不进行有效地抗乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）治疗，乙肝复发的风险为80%，3年存活率仅为44%。因此预防乙肝复发是提高乙肝肝移植患者生存率和生存质量的关键问题。肝移植术后由于病肝被切除，此时体内HBV负荷相对较低，如果能够进行相应的治疗、清除体内残存的病毒颗粒，就可能实现停用乙肝免疫球蛋白（Hepatitis B Immunoglobulin，HBIG）及抗病毒药物治疗。本课题以此为思路，首次采用针对HBV特异的免疫效应细胞（Immune Effector Cells，IEC），实现对HBV特异性的杀伤，从而实现HBV的完全清除。在本研究中通过动物实验验证免疫效应细胞在体内、外抗HBV的作用，明确预防乙肝复发的机制，为临床应用奠定基础。其主要研究成果如下：.1. 证实了HBV转基因小鼠及乙肝患者来源的对HBV特异的IEC，与体外异体的肝细胞共培养时，不会引起排斥反应，IEC自身不表达HBVcccDNA及HBV DNA，其安全性良好。.2. 探索出HBV感染患者来源IEC在体外对HBV复制具有抑制作用，同时能抑制细胞核内HBVcccDNA的复制，但并不引起HBV全基因序列的变异；Th1/Th2动态平衡及细胞因子在控制体外HBV复制中发挥重要作用，也是减轻肝细胞损伤的重要因素。.3. 动物实验显示了转HBV基因的小鼠来源的特异性IEC能对自体小鼠体内的HBV复制具有抑制作用，并且可改善肝功能。.4. 发现了在肝移植前加强患者抗病毒治疗，提高树突状细胞（Dendritic Cells，DC）对HBsAg和HBcAg抗原肽的递呈能力，诱导Th1、Tc1应答，对恢复患者针对HBV的主动免疫力有重要意义。.5. 初步验证了该治疗方案可提高乙肝患者肝移植术后HBsAb的血清学滴度、减少移植术后HBIG的用量，并有希望为最终实现乙肝肝移植术后停用抗病毒药物。.综上所述，本项揭示了特异性IEC在体内外对HBV复制具有抑制作用，安全性良好，有重要的治疗价值。此研究为建立新的乙肝肝移植术后预防乙肝复发的方案提供实验依据。截止该项目结题，已在《Viral Immunol》《IUBMB Life》等学术期刊上发表SCI论文4篇，在国内核心期刊上发表论文8篇，参加国内会议交流1次，培养博士后1名、博士研究生3名、硕士研究生6名。.