高密度脂蛋白样siRNA靶向载体的构建及在三阴性乳腺癌治疗中的评价

随着siRNA在治疗中的作用日渐受到重视，siRNA靶向传递成为急需解决的难题。本项目以申请人前期工作为基础，选择新型高密度脂蛋白样载体靶向传递siRNA。该载体具有安全无毒、体内循环时间长，体积小，易于穿过肿瘤组织进入肿瘤细胞等特点，是siRNA传递的理想载体。.本项目将构建构建JAG1蛋白抗体靶向介导的高密度脂蛋白样载体，负载siRNA及紫杉醇，通过系统的参数质控，优化实验条件，获得稳定参数，并应用于临床难治性三阴性乳腺癌，进行体外及体内小鼠肿瘤模型研究，以检测其基因及肿瘤抑制效果。明确其在肿瘤靶向治疗中的价值与优势，为具有我国自主知识产权的新型靶向药物载体的开发、研制及向临床应用的过渡提供科学依据。

RNA干扰（RNA interference，RNAi）是指由RNA诱发的基因沉默现象，其机制是通过小分子RNA（siRNA及micro RNA)进入细胞，引发同源目标mRNA降解。RNA干涉机制的发现，被称为人类基因治疗史上革命性的突破。然而其应用却受到一定限制，最大的困难在于小分子RNA物质在体内易被降解，而难于到达靶细胞内部。本项目构建了具有肿瘤靶向性的高密度脂蛋白样纳米载体（HDL-like peptide-phospholipid scaffold ，HPPS），该载体具有高密度脂蛋白的基本结构，采用磷脂、胆固醇、肽段及FDA批准可医用的高分子(PEG、PCL)构成，生物安全性高。载体表面亲水材料，使其能够长期循环，并具有明胶酶靶向性，可在高表达明胶酶的肿瘤部位富集。载体粒径控制在50nm以内，载体更易透过肿瘤基质进入肿瘤组织内部。ApoA蛋白样肽段使载体通过细胞膜表面SRB1通路进入细胞，使得载体能直接进入细胞质内保护其负载的化疗药物及小分子RNA物质不被溶酶体降解。这些结构使得载体可以安全、高效地将负载的RNA物质及化疗药物运送入肿瘤细胞。本项目构建了稳定的HPPS载体，研究载体的基本参数、体外释药、肿瘤靶向性及细胞毒作用，并应用于三阴性乳腺癌细胞株，建立裸鼠动物模型，观察体内外肿瘤抑制情况，明确其在肿瘤靶向治疗中的价值与优势，为具有我国自主知识产权的新型靶向药物载体的开发、研制及向临床应用的过渡提供科学依据。 目前已发表SCI论文3篇，会议论文1篇，在投论文3篇，培养研究生2名。