蛇床子安神新功效活性物质组研究

长期失眠损害心身健康甚至缩短寿命，目前缺乏理想的诱导正常睡眠药物。化学催眠药作用显著但易产生依赖、宿醉等不良反应；具安神功效的中药品种少，多数作用缓而弱。蛇床子除传统功效温肾壮阳、祛湿止痒外，尚含镇静催眠和促进学习记忆成分，课题组前期研究发现其醇提取物催眠作用强（62mg/kg与地西泮3mg/kg相当），宿醉反应较小，活性成分除已知蛇床子素等香豆素类外，还存在其它成分。本课题以生物效应指标跟踪分离蛇床子有效部位群、成分组，优选出催眠作用强兼具促记忆的活性组分，评价其对睡眠、醒后精神行为和学习记忆的影响，解析主成分群色谱多维特征数据与生物活性的谱效关系，进而采用LC-MS、IR、NMR逐步识别，指认有效成分，确定未知成分化学结构。探寻天然催眠活性组分，以期发现新的具催眠活性的先导化合物，为创制催眠新药奠定基础；增加蛇床子安神功效，提高其药用价值，扩大安神中药药源，促进资源开发利用。

蛇床子除传统功效温肾壮阳、祛湿止痒外，尚含镇静催眠和促进学习记忆成分。在前期研究证实蛇床子乙醇提取物催眠作用的基础上，以戊巴比妥钠协同睡眠时间为催眠生物效应指标，追踪到蛇床子醇提物通过大孔吸附树脂柱层析40%～95%乙醇洗脱部位具有催眠活性，其中50%乙醇洗脱物作用最强，优选出催眠活性强的有效部位，确定了蛇床子催眠活性成分组（CHC）的分离制备工艺；建立蛇床子成分组HPLC指纹图谱，与催眠生物活性强弱进行相关性及灰关联度分析，采用UV、TLC、HPLC-DAD和UPLC-QTOF联用技术指认催眠活性成分的归属，识别蛇床子具有催眠作用的物质基础为香豆素类成分中的蛇床子素、欧前胡素、佛手柑内酯和异虎耳草素，进而比较了单体化合物3mg/kg的催眠作用，结果显示异虎耳草素、佛手柑内酯及欧前胡素均显著延长戊巴比妥协同睡眠持续时间。制造PCPA（对氯苯丙氨酸）联合小平台水环境大鼠睡眠剥夺模型，CHC160mg/kg、80mg/kg显著延长睡眠剥夺大鼠持续睡眠时间、且明显增强其空间认知和空间参考记忆空间认知，降低PCPA小平台睡眠剥夺大鼠脑干NA、提高5-HT含量，表明催眠提高记忆作用机制与调节脑干内NA、5-HT等神经递质含量有关。CHC 520、260、130mg/kg单次和连续给药1、2、4周，随给药时间增加，小鼠持续睡眠时间延长，未见耐受性；CHC对小鼠觉醒后活动次数高于地西泮组，表明觉醒后宿醉反应较小；采用长期且逐量递增连续灌胃采用长期且逐量递增连续灌胃大鼠地西泮8周，随时间延长症状明显，而CHC大鼠戒断症状不明显。项目研究获得催眠活性强、副作用小，兼具促进学习记忆的蛇床子活性组分，新发现并确证欧前胡素、佛手柑内酯和异虎耳草素等3个单体成分具有显著催眠作用，为探寻天然催眠活性组分、发现新的具催眠活性的先导化合物创制新药奠定基础；增加蛇床子安神新功效，提高其药用价值，扩大安神中药药源，促进资源开发利用。