CCR5在自身免疫性心肌炎DC-Treg轴中的作用机理研究

新近有研究发现CCR5可诱导Treg细胞和DC细胞聚集至发病部位或淋巴结样组织，从而介导Treg细胞和DC细胞发挥免疫抑制作用，诱发免疫耐受的产生，减轻机体自身免疫性反应。我们的前期研究发现EAM小鼠心肌组织中有大量呈CCR5阳性表达的炎细胞浸润,且CCR5单抗可降低EAM小鼠的发病率和发病程度，抑制淋巴细胞对心肌肌球蛋白的增生反应，下调淋巴细胞分泌Th1细胞因子的能力，上调分泌Th2细胞因子的能力。因此CCR5与自身免疫性心肌炎的形成和发展密切相关，且CCR5单抗可能在自身免疫性心肌炎的发病及进展中发挥着十分重要诱导免疫耐受的作用。本项目研究EAM模型中CCR5在DC-Treg轴中的作用机理以及DC-Treg轴对CCR5+CD4+CD25+Treg细胞的影响，企图发现CCR5在EAM模型中的免疫调控途径及机制，为自身免疫性心肌炎的治疗和预防提供新思路和新方法。

本课题研究发现EAM小鼠外周血和脾脏CD4+CD45+CD25+FOXP3+细胞比例明显升高，且EAM小鼠脾CD4+CD25+ Treg中FOXP3+比例较对照组升高；而CD4+CD25+CCR5+T细胞Foxp3 mRNA表达含量较CD4+CD25+CCR5-T细胞和CD4+CD25+T细胞降低。在细胞增殖实验中，我们进一步发现EAM小鼠CD4+CD25+ Treg细胞增殖抑制功能较对照组减弱，CD4+CD25+CCR5+ T细胞较对照组以及EAM 组小鼠的CD4+CD25+CCR5- T细胞、CD4+CD25+ T细胞抑制功能减弱；且EAM小鼠CD4+CD25+ T细胞、CD4+CD25+CCR5+ T细胞较对照组分泌IL-10和TGF-β减少，EAM小鼠CD4+CD25+CCR5+ T细胞较CD4+CD25+ T细胞分泌TGF-β减少，但经IL-10刺激后T细胞抑制功能明显增强。小鼠过继实验中发现，EAM小鼠CD4+CD25+CCR5+T细胞可一定程度抑制过继性自身免疫性心肌炎的产生，经IL-10诱导CD4+CD25+CCR5+T细胞后再过继则可进一步显著改善心肌炎的发病情况。EAM 小鼠CD11c+ LNDC（淋巴结树突细胞）较对照组小鼠CD86、I-Ad表达比例增高，表型更为趋向于成熟，且IFN-α表达量增多。但与对照组小鼠相比，EAM 小鼠CD11c+ LNDC未能对CCR5+CD4+CD25+ T细胞的细胞增殖抑制具有诱导恢复的作用。综上所述，这些发现表明EAM小鼠CD4+CD25+CCR5+T细胞的T细胞抑制功能较CD4+CD25+CCR5- T细胞减弱，且分泌TGF-β较CD4+CD25+ T细胞减少，这可能与EAM小鼠体内细胞因子微环境改变以及Foxp3 的表达降低相关。