同源盒基因HOXB7在大肠癌转移中的作用及其分子机制研究

我们前期研究中筛选到与大肠癌转移密切相关的基因HOXB7，并证明其在高转移的大肠癌细胞株中及大肠癌组织中表达上调；过表达HOXB7促进S-1（低转移）细胞的增殖及侵袭能力、上调Snail、下调E-Cadherin表达。但其在大肠癌转移中的作用及分子机制仍有待深入探讨。本研究拟采用我们建立的来自同一亲本的低转移及高转移大肠癌细胞亚株，以稳定表达HOXB7及其RNA干扰细胞为模型；通过三维培养、可视化大肠癌原位动物模型等技术，在体内体外探讨HOXB7对大肠癌细胞浸润迁移能力的影响；通过荧光素酶活性测定、染色质免疫共沉淀等方法分析HOXB7对Snail及E-cadherin的调控机制，探讨HOXB7激活AKT信号通路从而上调Snail的可能机制；利用基因芯片技术及生物信息学方法探讨HOXB7的信号传导网络，揭示HOXB7在大肠癌侵袭转移中的作用机制，为大肠癌的转移治疗和药物筛选提供新的靶标。

项目完成情况：项目基本按原计划完成。.取得成果：1.建立了稳定表达HOXB7及其RNA干扰细胞（包括SW480/Vector、SW480/HOXB7、Ls174t/Vector、Ls174t/HOXB7、SW620/Scramble shRNA、SW620/shHOXB7、HCT116/Scramble shRNA、HCT116/ shHOXB7）；通过三维培养、可视化结直肠癌原位动物模型等技术，在体内外实验模型中探讨了HOXB7对结直肠癌细胞侵袭、迁移及转移能力的影响；通过免疫印迹等方法检测了HOXB7对MAPK、AKT信号通路的调控；通过荧光素酶活性测定、免疫共沉淀、染色质免疫共沉淀等方法分析HOXB7对Wnt/beta-Catenin的调控机制。2.确定了HOXB7促进结直肠癌细胞迁移、侵袭过程中的生物学功能及其在结直肠癌转移中的作用；发现HOXB7能激活MAPK、AKT信号通路及Wnt/beta-Catenin信号通路，进而促进结直肠癌进展、侵袭与转移；证实了HOXB7激活Wnt/beta-Catenin信号通路的分子机制是：HOXB7可以在细胞核内通过其同源盒结构域与beta-Catenin相互结合，并相互募集至TCFL/LEF1启动子，从而激活Wnt/beta-Catenin信号通路下游靶基因的转录。3.已发表SCI收录论文1篇（Clinical Cancer Research, 2011, SCI 影响因子7.742 ）；待发表论文一篇，预期影响因子大于7。.