基于MBP活化T细胞过继免疫探讨免疫细胞亚群在脊髓损伤修复中的作用

After spinal cord injury (SCI), a variety of different immune cell subsets may be infiltrated in the injured local microenvironment. Our previous study found that local activation of microglia, infiltration of monocytes and T cells play an important role in the damage and repair process of SCI. These cells may contain different functional subsets (neuroprotective and neurodestructive). The adoptive immunization with myelin basic protein (MBP)-activated T cells (MBP-T) to spinal cord injured rats could improve the local microenvironment of SCI, play a neuroprotective effect and its mechanism may be related to the balance between the impact of the above-mentioned different immune cell subsets. However, the specific role of these cell subsets in the pathogenesis of SCI remains controversial. The reason probably lies in the complexity of the local microenvironment of SCI and the inappropriate research methods. In this study, the adoptive immunization of MBP-T will be used as a means of intervention, the subsets of macrophages (microglia and infiltrating monocytes) and T cells in the injured spinal cord will be detected by combination of immunohistology and flow cytometry, to determine the "protective" or "destructive" immune cell subsets in the local microenvironment of injured spinal cord. These explorations will find new ways for the clinical treatment of SCI and provide theoretical and experimental basis.

脊髓损伤（SCI）后，损伤局部微环境会出现多种功能不同的免疫细胞。我们前期的研究发现：局部活化的小胶质细胞、浸润的单核细胞和T细胞在SCI的损伤和修复过程中扮演重要的角色，这些细胞可能包含不同的功能亚群（神经保护和神经损害）； 用髓鞘碱性蛋白(MBP)活化的T细胞（MBP-T）过继免疫SCI的大鼠，可以改善脊髓损伤局部微环境，发挥神经保护作用，其机制可能与影响上述免疫细胞亚群之间的平衡有关。然而，这些细胞亚群在SCI的发病机制中扮演的角色目前仍存在争议，其原因可能是SCI局部微环境的复杂性以及研究方法的局限。本研究拟采用MBP-T过继免疫作为干预手段，结合免疫组织学和流式细胞术等方法，探讨MBP-T过继免疫对脊髓损伤局部巨噬细胞（小胶质细胞和浸润的单核细胞）和T细胞亚群的影响，以确定损伤脊髓局部"有益"或"有害"的免疫细胞亚群，为SCI的临床治疗开辟新途径并提供理论和实验依据。

脊髓损伤（SCI）后，损伤局部微环境会出现多种功能不同的免疫细胞亚群。这些细胞亚群在SCI 的发病机制中扮演的角色目前仍存在争议，其原因可能是SCI 局部微环境的复杂性以及研究方法的局限。本研究采用髓鞘碱性蛋白（MBP）活化的Th2（MBP-Th2）和M2型巨噬细胞（M2细胞）过继免疫作为干预手段，结合免疫组织学和流式细胞术等方法，探讨MBP-T 过继免疫对脊髓损伤局部巨噬细胞（小胶质细胞和浸润的单核细胞）和T 细胞亚群的影响，以确定损伤脊髓局部"有益"或"有害"的免疫细胞亚群。.具体成果如下：.1.证明在没有任何治疗干预的情况下，在SCI的早期，神经损害性和保护性的免疫细胞在损伤局部均存在，但保护性的群体是一过性的，而损害性的存在时间长且占优势。这表明，自然条件下损伤脊髓局部微环境中的免疫细胞亚群是“阴阳”失衡的，破坏性的亚群占主导地位，是造成SCI病理损伤的重要机制；.2.证明Th2和M2细胞过继免疫具有神经保护作用，并对其机制进行了初步探讨，表明MBP-Th2 细胞过继免疫能够提高损伤局部Th2细胞的比例，使损伤局部以致炎性的Th1细胞和M1巨噬细胞为主向以保护性的Th2细胞、调节性T细胞和M2巨噬细胞为主的免疫应答方向转移；同样M2巨噬细胞过继免疫也可以提高损伤局部Th2细胞的比例，结果在脊髓损伤局部产生一个良性循环，有利于神经保护和功能恢复；.3.虽然，在脊髓损伤后的早期，通过MBP-Th2和M2细胞过继免疫，能够改善局部免疫微环境，为损伤的脊髓提供免疫保护。但是，这两种方法也都有其局限性，因为在实际应用中，细胞培养耗费的时间会错过早期免疫干预治疗的时间窗。因此，进一步进行深层面的分子机制探讨，寻找适于早期临床应用的小分子药物是我们需要努力的方向；.4.为了更深入地探讨脊髓损伤的详细机制，进一步对大鼠脊髓损伤不同时间点（急性期、亚急性期、慢性期）损伤局部组织在转录水平的变化进行了系统地分析，获得了转录组变化的原始数据，并系统地进行了生物信息学分析，鉴定了一些与脊髓损伤相关的重要分子和信号通路；.5.在为期三年的研究过程中，有10名研究生和11名中青年科研人员参与本课题的研究工作，参加国际会议和全国会议各一次，在中文期刊发表研究论文5篇，在SCI期刊发表论文6篇。综上所述，我们圆满完成了全部的研究计划，在取得了预期成果的基础上又提出了新的问题。