基于DNA条形码建立海参快速鉴定体系的研究

快速鉴定深加工制品中海参的种类，是目前亟待解决的技术难题。本研究以多种海参为研究对象，通过提取海参DNA、PCR扩增线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ（mitochondrial cytochrome c oxidase subunit Ⅰ，COⅠ）基因、测序，建立海参线粒体COI基因数据库，经比对分析，构建海参DNA条形码。在分析DNA条形码的基础上，设计海参种属特异性探针和DNA环介导的恒温扩增法( loop-mediated isothermal amplification of DNA, LAMP)引物，建立反向斑点杂交和LAMP两种分子生物学方法，分别用于海参种类的高通量筛选和快速准确鉴定。然后，将这两种方法有机结合，应用于海参及海参深加工产品的鉴定。本研究将为海参制品的质量监督、控制提供科技支撑，有利于海参产业链发展，提高我国海参深加工制品的可信度，具有显著的社会和经济效益。

海参自古以来就被亚洲人认为是珍贵的营养和保健食品。海参的种类繁多，价格存在着巨大差异。快速鉴定深加工制品中海参的种类，是目前亟待解决的技术难题。本研究以多种海参为研究对象，通过提取海参DNA、PCR扩增线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ（mitochondrial cytochrome c oxidase subunit Ⅰ，COⅠ）基因、测序，建立海参线粒体COI基因数据库，经比对分析，构建了海参DNA条形码。在分析DNA条形码的基础上，设计了海参种属特异性探针和种属特异性引物，建立了斑点杂交、PCR基础上的限制性酶切片段长度多态性和多重PCR三种分子生物学方法，分别用于海参种类的高通量筛选和快速准确鉴定。本研究还将上述方法有机结合，实现了深加工产品中海参种类的鉴定。本研究成果为海参及其加工产品的质量监督、控制提供了科技支撑，有助于提高我国海参深加工产品的可信度，有利于海参产业链的健康发展，具有重要的社会和经济价值。在项目执行过程中，课题组成员参加相关国际学术会议3人次。发表相关论文8篇，其中SCI收录论文4篇，中文论文4篇。申请国家发明专利2项，其中1项获得授权。项目负责人于2013年获得“山东省优秀硕士学位论文指导奖”，2014年获得 “教育部科技进步奖二等奖”1项（第5位），获得“山东省科技进步一等奖”1项（第12位）。