生物活性表皮生长因子检测与胃肠肿瘤研究

基本信息
批准号:39470785
项目类别:面上项目
资助金额:9.00
负责人:胡家露
学科分类:
依托单位:中国人民解放军第四军医大学
批准年份:1994
结题年份:1997
起止时间:1995-01-01 - 1997-12-31
项目状态: 已结题
项目参与者:王雨田,康永明,郭学刚,徐萍,王飚落,李新华,陈宝军,曹小燕
关键词:
表皮生长因子受体胃肠肿瘤
结项摘要

设计GFRⅢ区引物,PCR法《hEGF-RcDNA质粒扩增出560Kb片段,克隆于PUC19,测序证实该片段与hEGF-RⅢ序列相同。酶切切出hEGF-RⅢ定向克隆于表面呈现载体质粒pIβ2,重组构建PIERⅢ,将其转化于大肠杆菌JM109,获得hEGF-RⅢ表达菌棵,其表达蛋白量占细菌总蛋10(2)%。放射性受体分析证实(125)I-EGF可与表达菌特异性结合,其结合量随反应时间、温度而变化。Seatchard分析显示表达菌为单一亲和性EGF-R受体,解离常数为3.0×10(-11)mol/l每个细菌约有738个结合位点,免疫电镜显示EGF-RⅢ分布于菌膜上。利用配体竞争结合受体原理,初步建立了生物活性EGF放射分析检测方法,初步结果显示可较准确检测Ing以上生物活性EGF点生长因子。该新方法的稳定性正在研究改进中。

项目摘要

项目成果
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数据更新时间:2023-05-31

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