采用鸟枪法,以pUC18为载体,分别从嗜碱芽孢杆菌NTT89和NTT36中克隆到两个嗜碱基因(重组质粒PHCA和PGCA),均可使大肠杆菌XLT-blue,DH5α和HB101获得嗜碱性。通过Southern杂交和点杂交证明PHCA和PGCA分别puc18与NTT89和NTT36染色体DNA片段的重组产物。椐初步估计其分子量分别是6.6kb和15kb。将PGCA将克隆至PBI121上,转化大肠杆菌DH5α,仍能使KH5α获得嗜碱性。对含有PHAG和AGCA的大肠杆菌膜蛋白进行分析,发现在碱性。对含有PHAG和PGCA的大肠杆菌膜蛋白进行分析,发现在碱性条件下培养获得的膜蛋白图谱比中性条件下多出4-5条多肽链。根据以上结果推测,这两个嗜碱基因片段除含有结构基因外,还存在调节基因,操纵基因和启动部分,为一多顺反子结构。
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数据更新时间:2023-05-31
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