基于SDF-1趋化作用探讨创伤诱使脂肪干细胞的定向迁移分布

当前促进创伤修复的理想策略是使外源性干细胞有效补充于创伤部位发挥其组织重构和修复功能。干细胞疗法需要准确调控干细胞的迁移，否则治疗效果会受到很大的影响。我们前期实验发现静脉注射的脂肪来源干细胞（ADSCs）可部分定向迁移到创伤部位并具有促进修复的功能。SDF-1被认为是主要的干细胞归巢因子，研究认为ADSCs 在创伤修复过程中接受了它的调控。本项目通过建立大鼠后肢软组织创伤模型，体外检测SDF-1与创伤组织提取液对ADSCs的趋化作用，利用ELLESA分析二者相关性。然后将GFP和磁标记的ADSCs经动脉注入创伤鼠，近期用MRI对细胞进行活体示踪，远期用病理性示踪方法结合PCR定量分析、免疫细胞染色、组织学分析ADSCs在创伤组织中的定位分布、增殖活性、分化转归。进一步通过提高创伤组织内SDF-1水平来检测ADSCs的趋向迁移性能，为充分动员ADSCs促进创伤修复提供新策略。

项目背景：当前促进创伤修复的理想策略是使外源性干细胞有效补充于创伤部位发挥其组织重构和修复功能。干细胞疗法需要准确调控干细胞的迁移，否则治疗效果会受到很大的影响。我们前期实验发现静脉注射的脂肪来源干细胞（ADSCs）可部分定向迁移到创伤部位并具有促进修复的功能。SDF-1被认为是主要的干细胞归巢因子，研究认为ADSCs 在创伤修复过程中接受了它的调控。.主要研究内容：本项目建立大鼠背部软组织创伤模型，ELISA检测创伤组织中SDF-1的含量。然后将GFP标记的ADSCs经颈动脉穿刺注入创伤鼠，流式细胞术检测大鼠愈伤过程中血浆中脂肪干细胞水平，用小动物活体成像系统对细胞进行活体示踪，共聚焦显微镜观察ADSCs在创伤组织中的定位分布。进一步通过提高创伤组织内SDF-1水平来检测ADSCs的趋向迁移性能，为充分动员ADSCs促进创伤修复提供新策略。.重要结果及关键数据：结果显示SDF-1水平在上后24h到达峰值，而后持续下降；SDF-1干预过的大鼠血浆中脂肪干细胞含量在21d时达到峰值12%，空白对照组在7d时达到峰值6.28%，创伤大鼠在21d时达到峰值9.84%。在小动物活体成像仪内，对GFP-ADSCs进行活体示踪，可见外源性的SDF-1可增强ADSCs在创伤组织中的分布。定期获取大鼠创伤组织和循环血，对ADSCs进行组织病理示踪和Q-PCR分析，可见外源性的SDF-1可明显增加ADSCs由驻地迁出至血液中，并亦可增加ADSCs由血液循环迁移至创伤组织中。.结论：大鼠创伤部位的 SDF-1 水平的提高，可促进ADSCs 向靶组织趋化迁移，为充分动员 ADSCs 发挥促修复作用寻找新策略，对于干细胞疗法的广泛应用也具有重要的临床指导意义。