疼痛记忆对咬合干扰致慢性咀嚼肌疼痛的易化机制

Occlusal interference-induced chronic masticatory muscle pain is a common clinical condition that peripheral and/or central mechanisms are involved, but the etiology and pathogenesis are still unclear.Recent studies of pain in spinal cord level have indicated that pain memory play an important role in the transition of acute pain to chronic pain.While the development of orofacial pain has lagged behind that of the spinal models,very few studies focus on the effects of pain memory on chronic orofacial pain. A combination of behavioral, immunohistochemical and electrophysiological recording procedures are used in present research to investigate the role of pain memory in occlusal intereference-induced masticatory pain and inflammatory pain, and to explore the relationship between sitmulus and pain memory. To study the involvement of pain memory in the development and maintenance of chronic masticatory muscle pain, trigeminal gangliolysis is also performed to inhibit the nociceptive transmission.We also test the change of NMDA receptors in anterior cingulate cortex (ACC) in this model by Western bolt to explore if long-term potentiation (LTP) involving in the induction of occlusal intereference-induced chronic masticatory muscle pain.The results of present study may provide new clues for the mechanism of chronic masticatory muscle pain development and contribute to clinical treatment of chronic masticatory muscle pain.

咬合改变所致的慢性咀嚼肌疼痛是口腔医学难题，因致病机制不清，临床缺乏有效的治疗手段。近年脊髓水平疼痛研究提示，疼痛记忆可能参与疼痛由急性转变为慢性的过程。口颌面疼痛的研究远滞后于脊髓水平的研究，疼痛记忆是否也参与了慢性咀嚼肌疼痛的形成和维持，国内外均未见相关报道。本研究利用课题组前期建立的大鼠咬合干扰慢性咀嚼肌疼痛模型，在证明了咬合干扰与慢性咀嚼肌疼痛的因果关系及相关的中枢和外周机制的基础上，运用行为学、在体细胞外电生理、分子生物学等手段，多方面探索咬合干扰致咀嚼肌疼痛的急、慢性转变过程；研究咬肌咬合干扰性和炎性疼痛的疼痛记忆，通过三叉神经节阻滞基础伤害信号传导，分析疼痛记忆对咬合干扰致慢性咀嚼肌疼痛的形成和维持的易化机制；明确高级中枢长时程增强是否参与咬合干扰致慢性咀嚼肌疼痛的形成。研究结果将会对咬合干扰致慢性咀嚼肌疼痛的致病机制提出新线索，为治疗和早期干预罹患慢性咀嚼肌疼痛提供新途径。

慢性口颌面疼痛是口腔临床的难治疾病，可由多种因素导致，其中咬合干扰是导致慢性口颌面疼痛的重要原因之一。机体经历疼痛之后可以形成疼痛记忆，而疼痛记忆可影响机体对伤害刺激的感受。本课题利用大鼠动物模型对疼痛记忆是否参与慢性咀嚼肌疼痛的形成和维持进行了研究。通过对大鼠磨牙粘固金属冠建立咬合干扰致咬肌疼痛模型，并通过双侧咬肌内交叉注射角叉菜胶以及重复咬合干扰建立两类咬肌疼痛记忆模型。采用行为学、在体细胞外电生理、免疫荧光、分子生物学等手段，观察咬合干扰导致咬肌疼痛的程度和恢复时间、疼痛记忆是否易化咬合干扰所致的咀嚼肌疼痛。研究结果显示，0.2mm 和0.4mm咬合干扰5天以内去除，大鼠咬肌机械痛敏可逐渐恢复至正常水平，干扰程度越小、去除越早恢复越快，6天去除组至实验结束时仍不能恢复至正常水平。三叉神经脊束核星形胶质细胞和小胶质细胞均有相应的活化改变，胶质细胞活化程度与咬合干扰强度之间具有一定的关系。咬合干扰后7d大鼠双侧三叉神经节P2X4R mRNA表达较空白对照组上调，咬合干扰致大鼠咀嚼肌痛觉过敏可能与支配咀嚼肌三叉神经P2X4R表达水平升高相关。咬合干扰可以导致大鼠前扣带回突触长时程增强，咬合干扰7d和14d大鼠前扣带回NR2B受体含量显著增加。炎症性疼痛记忆加重了0.2mm咬合干扰引起的咀嚼肌疼痛，延缓甚至阻断了0.4mm咬合干扰去除后机械痛敏的恢复。二次咬合干扰4d去除出现咬肌机械痛敏恢复延缓，表明重复咬合干扰也可易化咀嚼肌疼痛。三叉神经脊束核胶质细胞活化参与了疼痛记忆易化咬合干扰致咀嚼肌慢性疼痛的过程，在大鼠机械刺激反应阈值最低点有明显活化。损伤海马记忆功能可阻断炎性刺激疼痛记忆的形成，并消除其对咬合干扰所致咀嚼肌慢性疼痛的易化作用。本研究揭示了咬合干扰致咀嚼肌慢性疼痛的重要高级中枢机制——疼痛记忆可以易化咬合干扰致咀嚼肌疼痛。研究结果为临床上分析疼痛记忆与咬合干扰所致的咀嚼肌疼痛的关系提供实验依据，指导临床把握咬合干扰所致咀嚼肌疼痛的治疗时机，并为治疗咬合干扰所致的咀嚼肌慢性疼痛提示新的切入点。