褪黑素对胃癌免疫逃逸机制的影响

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，表现为进展快、预后较差，5 年生存率低，严重影响着人们的健康和生活水平。相关研究资料显示，褪黑素与调节性 Treg细胞、Treg细胞与胃癌之间存在一定的功能联系。本项目是在前期完成多项省自然科学基金研究基础上，以CD4 +CD25 + Treg细胞为切入点，运用流式细胞术、激光共聚焦显微镜、及Real time RT-PCR、Western blot、双萤光素酶报告基因检测技术等手段，通过在体和体外研究，检测褪黑素干预后胸腺、脾、外周血、瘤体内等的 Treg细胞数量、特异性转录因子Foxp3、特异性蛋白Scurfin、Treg细胞分泌的细胞因子IL-10、TGF-β1，Foxp3启动子等变化探讨褪黑素对胃癌发生发展的影响及可能的机制，试图进一步揭示胃癌的免疫逃逸机制，为胃癌预防和治疗寻找新的思路，也为神经-内分泌-免疫网络与肿瘤的发生发展关系提供一定的理论基

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，5 年生存率低，严重影响着人们的健康和生活质量。以往资料表明，褪黑素与Treg细胞、Treg细胞与胃癌之间存在一定的功能联系。本项目是在前期完成国家基金和省自然科学基金项目基础上，以CD4+CD25+ Treg细胞为切入点，运用流式细胞术、激光共聚焦显微镜、及Real time RT-PCR、Western blot、双萤光素酶报告基因检测等手段，通过在体和体外研究，探讨褪黑素干预后胸腺、脾、外周血、瘤体内等的 Treg细胞数量、转录因子Foxp3、特异性蛋白Scurfin、细胞因子IL-10、TGF-β1，Foxp3启动子、以及癌基因c-Myc、抑癌基因p53和Bax、p21等的变化，试图揭示褪黑素对胃癌发生发展的影响及可能机制，进一步阐明胃癌的免疫逃逸机制，为胃癌预防和治疗寻找新的思路，也为神经—内分泌—免疫网络与肿瘤的发生发展关系提供一定的理论基础。本研究主要结果如下：.1. 无论在体实验还是体外实验，都表明褪黑素有显著的抑制胃癌细胞生长的作用，并呈一定的时间剂量依赖性。.2. 体内Treg细胞对胃癌发生发展有负调节作用，减少其表达是褪黑素抗肿瘤的作用途径之一。体外实验时Treg细胞未拮抗褪黑素对肿瘤细胞的增殖抑制作用，但上调肿瘤细胞survivin的表达，而CD4+CD25- T细胞则明显增强了褪黑素对胃癌细胞的survivin及caspase-3的影响。褪黑素在抑制胃癌细胞增殖过程中能明显上调Treg细胞的Foxp3mRNA表达，呈剂量依赖性，但对Foxp3启动子转录活性无影响。.3.褪黑素体外抑制胃癌细胞时伴有TGF-β1表达增高，并呈时间依赖性；抗TGF-β1中和抗体与siRNA介导的TGF-β1沉默二者联合应用能早期拮抗褪黑素对胃癌细胞的抑制作用。TGF-β1信号通路改变可能是褪黑素抑制胃癌细胞的作用机制之一。.4.褪黑素的抑癌作用可能与其降低胃癌细胞凋亡抑制蛋白survivin、livin、Bcl-2和癌基因c-Myc的表达、上调抑癌基因p53和Bax、p21的表达，激活caspase-3的活性等相关。激活凋亡信号通路可能是褪黑素抑制胃癌细胞的作用机制之一。.5.褪黑素抑癌过程中上调膜受体MT1、MT2表达，而SiRNA介导的MT2沉默可部分拮抗褪黑素对MFC细胞增殖的抑制作用，表明MT2介导的信号通路可能