癌/睾丸抗原HCA587对转录因子NF-κB的调节作用研究

HCA587是我室利用肝癌患者血清筛选肝癌组织cDNA文库获得的一个癌/睾丸抗原，属于MAGE家族成员。由于这类分子表达于多种组织类型的肿瘤细胞，被认为是肿瘤免疫治疗的理想候选靶点。我们通过生物信息学分析，发现HCA587序列中存在两个"9个氨基酸反式激活结构域"（简称9aa TAD）,哺乳动物中多个转录因子（如NF-κB，p53等）通过此结构域与TATA结合蛋白相关因子（TATA-binding protein(TBP)associated factor）TAF9结合，调控靶基因转录。我们的初步实验结果证实HCA587可与TAF9结合，且HCA587表达的下调可引起多个NF-κB 调控的靶基因转录水平的降低。本研究拟通过HCA587与TAF9间的相互作用，探索HCA587影响NF-κB调控靶基因转录的机制，揭示肿瘤抗原HCA587在肿瘤发生、发展中的作用，为肿瘤的治疗提供新的靶点。

HCA587，又名MAGE-C2，属于MAGE I类家族成员，是我室利用SEREX方法获得的一个新的癌/睾丸抗原。由于其在正常组织仅局限表达于睾丸而在多种类型肿瘤组织中广泛表达，因此被认为是理想的用于肿瘤免疫治疗的候选分子。 国内外的大部分研究主要集中在对MAGE家族成员的抗原表位的鉴定及其诱导机体产生免疫应答的能力，而对MAGE家族成员在肿瘤发生、发展中的生物学功能的研究很少。我们的课题从寻找与HCA587相互作用的分子入手，探索HCA587在肿瘤细胞中的生物学功能。首先我们通过生物信息学分析，发现HCA587蛋白的序列存在两个可与TATA结合蛋白相关因子TAF9结合的“9个氨基酸反式激活结构域”，进一步通过生物学实验证实了HCA587可与TAF9保守结构域（CR）发生直接结合，并对nf-kb调控的靶基因具有调节作用，对TNF-α诱导的细胞凋亡具有抵抗作用；另一方面，我们通过免疫共沉淀-质谱分析的方法，发现HCA587可与抑癌基因BS69发生相互作用，并通过增加BS69的泛素化水平促进其通过蛋白酶体途径降解，从而增强LMP1诱导的NF-B通路的激活。我们的研究进一步揭示了HCA587在肿瘤细胞的表达并不是细胞发生恶性转化过程中形成的无任何生物学功能的副产品，而是在肿瘤细胞的发生、发展中发挥重要作用。该研究不仅为HCA587蛋白作为肿瘤疫苗应用于临床提供了有力支持，同时也为肿瘤的药物治疗提供了新的靶点。