基于调控USP8表达的木犀草素对TLR4介导的促炎症细胞因子的作用和机制研究

脑内小胶质细胞的活化引起的神经炎症是阿尔茨海默病（AD）重要的发病机制之一。以抑制小胶质细胞活化为靶点，抑制神经炎症和减轻炎症反应，从而改善和阻断AD的进展，是防治AD的一个有效策略。课题组研究发现木犀草素可有效的抑制激活的BV2小胶质细胞中促炎症细胞因子的释放，发挥对海马神经元的保护作用。运用蛋白质组学技术进一步研究发现，木犀草素可上调USP8的表达，而USP8的高活性可能是AD一个潜在的治疗靶点。因此，我们拟利用木犀草素从体内实验和体外实验进行研究，阐明木犀草素可通过调控USP8的表达抑制MyD88依赖的信号途径，调节TLR4介导的促炎症细胞因子的释放，进而抑制神经炎症和减轻炎症反应，改善和阻断AD的进展。这将对为评估目前通过抑制神经炎症反应的治疗策略以及为研发天然、安全的抗AD药物提供重要的理论基础和新思路方法。

本研究采用脂多糖（LPS）诱导BV2小鼠小胶质细胞为活化的细胞模型，探讨木犀草素对神经炎症的抑制作用，减轻小胶质细胞活化所致神经元损伤的作用机制；阐明木犀草素有效的药物作用靶点；揭示调控泛素特异性修饰酶8（USP 8）的表达对Toll样受体4（TLR 4）介导的神经炎症在阿尔茨海默病（AD）发病机制中的作用，为研发天然、安全的防治AD的药物提供新思路和新方法。. 本研究通过体外实验的一系列分子生物学、细胞生物学、免疫化学的技术证实，(1)木犀草素可以明显抑制LPS刺激BV2小胶质细胞的活化，减少炎症因子NO，PGE2，IL-1B，TNF-a在转录水平和翻译水平的表达，且成剂量依赖性。(2)木犀草素可能通过抑制TLR4介导的NF-κB、MAPK及Akt通路，减少炎症因子的释放，减轻神经炎症从而发挥神经元的保护作用。(3)木犀草素作用后USP 8基因表达增加。沉默USP8的表达可增加炎症因子的释放。(4)USP8的高活性可能是治疗AD的一个潜在靶点。综上所述，木犀草素是通过调控USP 8 的去泛素化作用调节TLR4 介导的MyD88依赖途径，抑制促炎症细胞因子的释放，进而抑制神经炎症和减轻炎症反应，改善和阻断AD的进展。. 本项目研究已达到预期目标：证实了我们提出的科学假说，协助陆大祥教授对3名在读研究生的培养，参加学术会议2次，发表了标注该课题资助基金号的学术论文1篇（SCI收录，IF=4.4），同时处在修订状态的SCI收录论文2篇。同时，在受到本课题项目资助的基础上，我们又成功申请获批了2个科研项目。