用Vero细胞传呼吸道合胞病毒(RSV),直接用细胞病毒混合物用改良胍热酚法提取病毒mRNA。反转录第一链CDNA用PCR法成功扩增RSVg基因,电泳检测在900bp处出现特异带。回收扩增片段,用内切酶PstI将cDNA酶切为两个片段:500bp和400bp。分别插入到PGEM3Z中去,转化DH52菌,挑选白斑。经检测4株病毒g基因8个片段全部成功获得重组克隆。用双脱氧法进行全部克隆核苷酸序列测定工作,获得满意结果。发现我国RSV363/81(st)株与国际标准株Long/56株(美国)尽管分离年代相差25年,但其核苷酸仅相差10个,同源性高达98%,为主要流行株,将来制备疫苗时可优先考虑。国内另外几株间变化较大,同源性在87%左右,通过比较强弱株g基因核苷酸序列差异,为RSV疫苗的研制提供了理论依据。
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数据更新时间:2023-05-31
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