Ca2+泵在植物生长发育和逆境适应中的功能还很不清楚,本研究就是有目的的选择定位于不同细胞器上且表达量较高的钙离子泵,利用RNAi技术获得多种Ca2+泵突变体,应用这些突变体来系统研究Ca2+泵在植物Ca2+营养和Ca2+信号网络中的作用。实验根据拟南芥基因组信息,采用PCR的方法,扩增4-6种Ca2+泵基因的特异片断200-400bp,分别构建组成型启动子35S和诱导型启动子RD29A驱动的表达双链RNA 的植物载体,通过农杆菌介导的方法,转化拟南芥植物。对阳性植株进行分子检测包括PCR,Northern杂交,免疫印迹等技术筛选转基因植株。对Ca2+泵被RNA干扰的转基因植株进行各种表型的鉴定以及适应非生物逆境胁迫的能力,包括生理生化指标的检测。最后有目的选择几种Ca2+泵突变体,采用叶片游离原生质体的基因瞬间表达技术,利用报告基因研究Ca2+调节的基因表达情况是否受到影响?
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数据更新时间:2023-05-31
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