TN-c及Periostin构筑的“癌栓微环境”在胰腺癌血行转移中的作用

The formation of tumor embolus by platelet-tumor cell aggregating in the circulation facilitates the survival and the microvascular arrest of tumor cells at the distant sites.the ECM in tumor embolus plays very important roles in the process. The mechenism is not very understood. Our previously study showed that, the interaction of platelet with tumor cell promoted the formation of the fibrous TN-C and POSTN,which may play a key role in this metatatic process.We thus hypothesize that, in the circlation,the TN-C and POSTN ECM in tumor embolus may change phosporylation of Fyn in the tumor cells, thus resulting in transformation of tumor cell phenotype,includeing CD44v, EMT-MET, and integrin profiles. These changes facilitate the aggregation of tumor cell to platelet, the survival and proliferiation of tumor cell in the microenviroment of tumor embolus. In this proposal, we initially investigate the mechanism of the fibrous TN-C and POSTN formation in the cells and tissues, and then apply gene expession , co-immunoprecipatation, RNAi to identify the mechanisms of Fyn phosphyation induced TN-C and POSTN ECM , thus resulting in EMT-MET transformation and remodeling the CD44v and integrin profile. From this study we hope to discover new theories to elucidate metastasis of pancreatic cancer and find a new strategy for the treatments of pancreatic cancer.

瘤细胞与血小板粘附形成的瘤栓是胰腺癌在血循环中生存并致远处转移的重要环节，瘤栓微环境发挥着重要作用，但具体机制不清。前期研究显示：瘤细胞与血小板粘附形成纤维样TN-C及POSTN可能是瘤细胞在瘤栓中生存的关键。结合文献推测：进入血循环中的瘤细胞通过与血小板结合，形成含有TN-C/POSTN的特殊瘤栓微环境；瘤栓中ECM蛋白与瘤细胞相互作用，维持信号分子Fyn的磷酸化活性，促使瘤细胞表型重塑，有利于肿瘤细胞在瘤栓中生存增殖。本项目拟从组织和细胞学水平阐明瘤细胞通过CD44与血小板结合，促进纤维样TN-C/POSTN的形成机制；利用可调控的基因表达、siRNA、三维培养等技术，研究TN-C/POSTN ECM调控Fyn的磷酸化修饰，进而实现对瘤细胞的表型重塑以及瘤细胞在血循环中的生存机制，并进行体内、体外实验验证。最终阐明瘤栓微环境调控胰腺癌血行转移分子机制，为临床预测胰腺癌转移奠定基础

肿瘤细胞与血小板粘附形成的瘤栓是胰腺癌在血循环中生存并致远处转移的重要环节。发现了TN-C及POSTN是胰腺癌癌栓微环境的重要分子, 从组织和细胞学水平研究了肿瘤细胞TN-C、POSTN的形成机制,利用可调控的基因表达、siRNA、三维培养等技术，阐明了信号分子Fyn蛋白质磷酸化对胰腺癌细胞表型重塑以实现胰腺癌细胞在瘤栓中生存与增殖最终导致远处转移的分子机制,发现了肿瘤细胞通过外泌体miRNA促进了血小板的激活，维持胰腺癌细胞的干性特征，有利于肿瘤细胞在血液中的生存，促进远处转移。阐明了瘤细胞通过CD44与血小板p-selectin结合，促进TN-C，POSTN的分泌并有效地储存于ECM中，形成特殊的瘤栓微环境。瘤栓微环境中ECM蛋白通过与瘤细胞 Integrin相互作用，维持信号分子Fyn一定的磷酸化活性，促使瘤细胞表型重塑，重塑的瘤细胞通过其细胞表面受体CD44v及Integrin与瘤栓微环境中的ECM蛋白结合，有利于肿瘤细胞在瘤栓中生存增殖，最终导致胰腺癌转移。进一步研究发现，胰腺癌细胞通过外泌体参与细胞间通讯传递以促进肿瘤发生发展，通过芯片分析及分子生物学研究发现胰腺癌外泌体携带的非编码RNA（LncSox2ot, LncAK296146; circPDE8A, circIARS; miR222, miR876）通过作用于靶基因调节胰腺癌细胞EMT表型转换及干性特征，调节细胞外基质蛋白的表达及对血小板的激活，促进了肿瘤细胞在血行中的生存及细胞间的黏附，参与了肿瘤细胞的增殖与转移，与胰腺癌患者的预后生存相关。