热应激对公兔精子生成的影响及分子机制

本项目重点研究热应激对公兔精子发生的影响及其分子机制。首先，通过免疫组织化学方法检测公兔睾丸和精子中各亚型热休克蛋白（HSPs）的表达情况。其次，通过睾丸水浴的方法给予公兔一定热应激，分别检测精液品质、睾丸组织中各级生精细胞凋亡，以及睾丸中热休克蛋白转录因子（HSFs）表达的变化。在此基础上，利用荧光素酶报告基因和染色质免疫共沉淀（Chip）的方法研究HSFs对于睾丸特异性表达的HSPs基因的转录调节作用，同时通过GST融合蛋白和蛋白免疫共沉淀技术探讨HSPs和精子生成相关周期蛋白或周期蛋白激酶之间的相互作用关系，以此来阐述热应激对生精过程影响的分子机理。.本研究结果对认识热应激调控精子生成机制以及减少热应激在畜禽生产上的危害提供新的理论依据和实验基础。

本项目重点研究了热应激对公兔精子发生的影响及其分子机制。首先通过免疫组织化学方法检测了兔睾丸和精子中各亚型热休克蛋白（HSPs）的表达情况，检测了公兔热应激后精液品质、睾丸组织中各级生精细胞凋亡，以及睾丸中HSPs和热休克蛋白转录因子（HSFs）表达的变化。成功构建了兔HSF1基因的真核表达载体，并证明转染了兔HSF1基因后，家兔细胞中HSP70和HSP90的蛋白表达水平明显增加。蛋白质免疫共沉淀的结果显示，HSP70与cyclinD1存在相互作用，提示一种可能的热休克蛋白参与精子发生过程的机制。部分研究结果已经整理并发表了3篇SCI收录论文，分别发表在《Cell and Tissue Research》，《Cell Stress and Chaperones》和《Livestock Science》杂志上。