基于体内分布及机体应答部位差异性的川木香煨制与归经趋向相关性研究

Based on the priliminary research results which indicated that there were difference of chemical components, pharmacological actions and internal absorption, the relationship between roasting and channel tropism will be studied from distribution in vivo and drug response according to the clinical practice. Under the guidance of syndrome differentiation and holistic view, the profiling of chemical components distributed in the stomach and colon mucous membrane and endogenic micromolecule metabolite acted in the body will be researched through chemical profiling technology and metabonomics strategy based on LC/MS, GC/MS and animal model of gastric ulcer and colon ulcer. Furthermore, the exogenous chemical components which can reflect the difference of the sites of distribution and endogenic biochemical componentes which can reflect the difference of the sites of drug response will be screened to clarify the relationship between roasting and channel tropism from the perspective of pharmacodinamics and pharmacokinetics. It is important for the researchers to enrich the scientific connotation of drug property changed by drug processing, guide the clinical application and develop the new drug.

以川木香煨制前后化学成分、药理作用改变，体内吸收部位差异等前期研究为基础，依据"生熟异治，归经有别"即生用理气和胃、煨熟实肠止泻的临床实践，提出从体内分布和机体应答角度研究川木香煨制与归经趋向相关的科学命题。项目在中医辨证论治、中药多成分整体观理论指导下，以大鼠胃溃疡、溃疡性结肠炎为模型，整合基于LC-MS/GC-MS的化学轮廓技术和代谢组学策略，结合多变量数据处理方法，开展川木香煨制前后在特异性发病部位胃、结肠黏膜层中，体内分布的化学成分组轮廓特征、机体应答的内源性小分子代谢物轮廓特征，并筛选出表征体内分布部位差异性的外源性化学成分（化学标志物）和机体应答部位差异性的内源性生物化学成分（生物标志物），从药效学-药动学角度阐明川木香煨制与归经趋向的相关性。项目研究结果可丰富川木香煨制改变药性的科学内涵，有利于指导川木香的临床合理应用，并为川木香创新药物的开发提供重要参考。

课题以川木香煨制与归经趋向相关性为中心，采用胃溃疡、溃疡性结肠炎两种疾病动物模型，开展川木香生品、煨品的药效、药动学差异研究。研究结果表明，川木香煨品水煎液对乙醇所致大鼠胃溃疡的保护作用优于生品，主要是通过改善TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA、SOD、NO、iNOS、血乙醇在大鼠体内的水平，影响HO-1、NRF2、NF-κB p65、IκBα在胃组织中的表达量发挥抗胃溃疡作用，其中尤以煨品高剂量作用最佳，与阳性药奥美拉唑作用相当。课题组进一步开展了不同配伍比例木香烃内酯（COS）和去氢木香内酯（DEH）对胃溃疡的保护作用研究，当配伍比例为3:1时对胃溃疡预保护作用最佳，此组合物已申请了专利。其次，对DSS诱导的大鼠溃疡性结肠炎保护作用的整体药效学结果显示，川木香生品和煨品可以显著性降低TNF-α、IL-6、 IL-1β、MPO的含量，显著性升高结肠中TGF-β的含量发挥抗炎作用。为进一步研究煨制与功效变化的相关性，开展了川木香煨制前后COS和DEH在体内的分布与药代动力学研究，结果表明，两种成分在各组织部位的分布具有趋向性，尤其是在胃肠道组织部位的分布程度较高；煨制前后两种成分体内药物行为存在差异，煨制后两者在体内药峰浓度降低、吸收加快，滞留时间缩短；相比DEH，COS的体内达峰时间更短，体内作用时间更长。并通过开展COS在不同人工胃液、肠液中的稳定性研究，发现COS在人工胃液不稳定、易降解的特性。同时，采用网络药理学构建“成分-靶点-通路”网络，得到与COS和DEH相关的多条有效抗癌作用通路；利用高速逆流色谱技术分离得到川木香中COS、DEH及其他3个片段，通过细胞毒性实验发现COS、DEH对包含胃肠道肿瘤在内的多种癌细胞具有较好的生长抑制作用，并进一步发现两种成分配伍后对肠抑制、胃亢进的改善作用更优。以上结果初步揭示了川木香煨制前后药效学与作用机制、体内分布与药代动力学差异。研究结果提示川木香煨制前后功效差异性与其药效成分在体内代谢差异有关，药效成分体内代谢行为差异所产生的不同药源性代谢物可能是影响功效变化的关键因素。这有待于进一步从药效成分代谢行为差异性角度进行川木香煨制前后功效变化的物质基础及作用机制研究。