miR-183/-96/-182基因簇对乳腺癌诊断及治疗作用的机制研究

Breast cancer is a family of diseases that involve unregulated breast epithelial cell growth and division, which is caused by many different carcinogenic factors. This project try to figure out a new strategy for breast cancer diagnosis and treatment based on the intensive studies on miR-183/-96/-182 cluster which is highly expressed in breast cancer.The specific aims of this project include: 1) Compare the expression levels of miR-183/-96/-182 cluster in different types of breast cancer by northern blot. 2)Research on the regulation mechanism of miR-183/-96/-182 cluster itself by 5'-RACE and promoter analysis. 3)Confirm partial target genes of miR-183/-96/-182 cluster and find out miR-183/-96/-182 cluster's function on breast cancer by RT-PCR, western blot and luciferase reporter assay. 4)Observe the impacts of miR-183/-96/-182 on breast cancer cells after changing its expression level. Our work can determine the specific breast cancer types that can be treated by miR-183/-96/-182 cluster targeted therapy; understand the regulation mechanism of miR-183/-96/-182 cluster itself and its function on its target genes; and finally reduce the tumorigenesis,migration and invasion of breast cancer by regulating the expression level of miR-183/-96/-182 cluster.

乳腺癌是乳房腺上皮细胞在多种致癌因子作用下, 生长增殖机制失常而引起的疾病。本项目将对乳腺癌中高度表达的miR-183/-96/-182基因簇进行深入研究，达到诊断及治疗乳腺癌的目的。研究内容包括：1）通过RNA印记法比较不同类型乳腺癌中miR-183/-96/-182基因簇的表达量。2）通过5'-RACE及启动子分析研究miR-183/-96/-182基因簇自身调控机理。3）通过RT-PCR,蛋白印记及荧光素酶分析确定部分miR-183/-96/-182基因簇靶向基因及其对乳腺癌的调控机理。4）操纵miR-183/-96/-182基因簇表达，改变癌细胞属性。本研究能确定miR-183/-96/-182基因簇靶向治疗的乳腺癌类型；阐明miR-183/-96/-182基因簇自身及其对靶向基因的调控机理；从而降低乳腺的肿瘤发生率，迁移速度和侵入性。

本项目旨在对乳腺癌中高度表达的miR-183/-96/-182基因簇进行深入研究，达到诊断及治疗乳腺癌的目的。主要研究内容及结果包括：1.研究miR-183/-96/-182基因簇在不同类型乳腺癌中的表达情况，发现其在多数乳腺癌中表达增加，但是在不同的乳腺癌亚型中表达水平存在差异：在 Her2-enriched亚型中，miR-96，miR-183高于其他亚型；在Basal-like亚型中miR-182低于其他亚型，而miR-183高于其他亚型；2.研究miR-183/-96/-182基因簇自身的调控机制，发现miR-183、miR-96、miR-182是由同一条pri-microRNA转录而来，其转录受转录调节因子ZEB1、HSF2的调节；3.寻找新的miR-183/-96/-182基因簇靶基因，发现miR-183可直接靶向RAB21基因，诱发染色体异常而引起细胞癌变；4.操纵miR-183/-96/-182基因簇的表达，改变乳腺癌细胞的性质，为乳腺癌的治疗提供理论依据，研究表明在细胞水平上，降低miR-183/-96/-182基因簇可抑制癌细胞生长及转移，其inhibitor有望开发为新型抗肿瘤药物。项目进展顺利，基本完成了预期目标，并进行了适当扩展，深入研究了癌症中miRNA的调控机制以及抗癌药物的吸收、外排机制。主要研究成果包括：发表论文共有5篇，其中国际权威SCI论文2篇，国际重要SCI论文3篇；指导研究生4人，其中1人毕业，1人获得国家级奖学金。本项目确定了miR-183/-96/-182基因簇可作为乳腺癌靶向治疗的靶标；阐明了miR-183/-96/-182基因簇和其他microRNA自身及其对靶向基因的调控机理；为乳腺癌的诊断和治疗以及新型抗癌药物的开发提供了理论基础。