氧化应激在稳定性冠心病患者内皮祖细胞变化中的作用及机制的研究

本项目拟在前期的稳定性冠心病（CAD）患者内皮祖细胞（EPC）数量、黏附和迁移功能变化的基础上，首先进一步观察CAD患者EPC的在体血管生成能力和旁分泌功能的变化。为明确其机制，拟观察CAD患者EPC ROS水平，NADPH氧化酶、抗氧化酶、NO活性，GPx、MnSOD的表达，NADPH氧化酶各亚单位、Akt、eNOS、ERK1/2、p38MAPK的表达及磷酸化水平，p47phox与NOX2、NOX4结合及膜转位情况；然后采用化学抑制剂或siRNA抑制NADPH氧化酶、eNOS、p38MAPK、ERK1/2、Akt及PKC表达，以进一步明确氧化应激在CAD患者EPC变化中的作用及NADPH氧化酶影响EPC功能和衰老的上、下游信号转导机制。本项目的系统研究有望进一步深入、系统地阐明CAD患者EPC变化及机制，将为改善CAD患者EPC功能提供新的治疗靶点，并为临床进一步应用EPC提供技术保障。

本项目在前期稳定性冠心病（CAD）患者内皮祖细胞（EPC）数量、黏附和迁移功能变化的基础上，进一步观察CAD患者EPC的在体血管生成能力和旁分泌功能的变化。为明确其机制，观察了CAD患者EPC ROS水平，NADPH氧化酶、抗氧化酶、NO活性，GPx、MnSOD的表达，NADPH氧化酶各亚单位、Akt、eNOS、ERK1/2、p38MAPK的表达及磷酸化水平，p47phox与NOX2、NOX4结合及膜转位情况；然后采用化学抑制剂或siRNA抑制NADPH氧化酶、eNOS、p38MAPK、ERK1/2、Akt及PKC表达，以进一步明确氧化应激在CAD患者EPC变化中的作用及NADPH氧化酶影响EPC功能和衰老的上、下游信号转导机制。.目前该项目已经基本完成，获得以下结论：.1.稳定型冠心病患者EPCs内NADPH氧化酶激活，ROS产生增加，MDA水平增高，反应了高氧化应激水平。.2. 稳定型冠心病患者EPCs内抗氧化酶SOD和CAT活性降低，NO分泌减少，旁分泌IL-8、VEGF、SDF-1和HGF功能和在体成血管能力减弱。.3. 稳定型冠心病患者EPCs内NADPH氧化酶各亚基表达均增加，并通过p47phox活化转位至胞膜并与Nox2亚单位结合而激活，其中PKCα/β2 信号途径可能参与激活。.4. 稳定型冠心病患者EPCs中，NADPH氧化酶对p38MAPK、ERK和PI3K/Akt/eNOS信号通路的激活有重要的调节作用。.5. 稳定型冠心病患者EPCs中, P38MAPK信号通路与EPCs衰老和粘附有关，ERK信号通路与EPCs迁移和粘附有关，而PI3K/Akt/eNOS信号通路与EPCs衰老密切相关。 NADPH氧化酶在冠心病EPCs功能发挥中具有重要作用，它可能通过p38MAPK、ERK和PI3K/Akt/eNOS信号通路影响EPCs的迁移、粘附和衰老。.本项目的系统研究进一步深入、系统地阐明CAD患者EPC变化及机制，将为改善CAD患者EPC功能提供新的治疗靶点，并为临床进一步应用EPC提供了技术保障。