白介素-27在肺结节病发病机制中作用的探索

Sarcoidosis is a systemic granulomatous disorder with unknown pathogenesis that most often affects the lungs and may cause significant respiratory failure, blindness, liver cirrhosis or morbidity. Kinds of CD4+ T cells, including T helper (Th)1, Th2,Th17 and iTreg cell, play critical roles in the immunopathogenesis of sarcoidosis. Our previous research in 2013 had shown that there were significant disturbance of Th17/Treg cells and dysfunction of iTreg cells in stage I/II pulmonary sarcoidosis patients. Interleukin-27 plays an important role in the regulation of CD4+T cell differentiation and their immune response. So, IL-27 might be involved in kinds of Th cells associated inflammatory disease. This study will attempt to (1)test the concentrations of serum IL-27 with enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for stage I/II pulmonary sarcoidosis patients and healthy volunteers, and examine the mRNA expression of IL-27 in the peripheral blood and bronchoalveolar lavage fluid (BALF) for those pulmonary sarcoidosis patients by real-time quantitative polymerase chain reaction; (2) investigate the differences among the effects of IL-27 on kinds of Th cells from peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) and CD4+T naive cells of sarcoidosis patients and healthy volunteers by flow cytometry and ELISA; and (3) evaluate the association between IL-27 gene polymorphisms and the development of sarcoidosis by 5’ exonuclease TaqMan genotyping assays. These results in turn will help to elucidate the role of IL-27 in pulmonary sarcoidosis and may imply the treatment role of exogenous IL-27 for sarcoidosis patients.

结节病是一种发病机制未明、可累及全身多个器官的系统性肉芽肿性疾病，肺是最常见的受累部位，严重时导致呼吸衰竭、失明、肝硬化、死亡等。包括T辅助（Th）1、Th2、Th17和调节T（Treg）细胞等多种CD4+T淋巴细胞在结节病的免疫病理过程中起重要作用。我们的前期研究（2013年）发现，I/II期肺结节病患者体内存在Th17/Treg细胞的失衡、Treg细胞功能缺陷。白介素（IL）-27可以通过影响上述多种Th细胞的分化、效应而在多种由免疫病理机制介导的疾病中起重要作用。本研究拟通过（1）比较健康对照者和I/II期中国肺结节病患者外周血以及患者支气管肺泡灌洗液IL-27水平；（2）比较IL-27对上述两组研究对象外周血中单个核细胞和纯真CD4+T淋巴细胞干预效果的差异；（3）比较两组研究对象IL-27基因多态性等方面，来探索IL-27在结节病发病中可能的作用，为结节病的治疗提供新思路。

结节病是一种病因和发病机制不明、累及全身多个器官和多个系统的系统性肉芽肿性疾病，肺是最常见的受累部位，严重时会导致呼吸衰竭、失明、肝硬化、死亡等严重后果。包括T辅助（Th）1、Th2、Th17和调节T（Treg）细胞等多种CD4+T淋巴细胞在结节病的免疫病理过程中起了重要作用。我们的前期研究（2013年）发现，I/II期肺结节病患者体内存在Th17/Treg细胞的失衡、Treg细胞功能缺陷。从文献看，白介素(IL)-27可以通过影响上述多种Th细胞的分化、效应而在多种由免疫病理机制介 导的疾病中起重要作用。本研究拟通过比较健康对照者和中国肺结节病患者IL-27水平、比较IL-27对上述两组研究对象外周血中单个核细胞和CD4+T淋巴细胞干预效果的差异以及比较两组人群IL-27基因多态性等方面，来探索IL-27在结节病发病中可能的作用，为结节病的治疗提供新思路。在课题过程中，通过：1. 比较健康人与中国肺结节病患者外周血包括IL-35、IL-27等在内IL-12家族因子，发现，结节病患者IL-35、IL-27水平低于健康对照组。2. 分离结节病患者外周血单个核细胞以及CD4+ T细胞单独培养，并予以IL-27刺激、通过流式细胞学分析，初步发现，能使得Th17细胞水平下降、Treg细胞比例有上升趋势。3. 已完成通过qPCR的方法比较两组患者的EBI3、p28等检测，结果正在进一步分析中。本研究的结果将对进一步认识结节病的发病机制、拓宽难治性结节病的治疗思路提供帮助。