经血来源的间充质干细胞对乳腺癌的趋向作用及其内在机制研究

One source of blood mesenchymal stem cells (MenSCs), is a new type of adult stem cells found in recent years, women in the blood from the separation of convenient access and expansion, have plasticity/low immunogenicity and very low tumorigenicity etc. Characteristics. MenSCs is the inner nature of research and application in research, MenSCs to the tumor and internal mechanism of the tendency is a key problem. In the course of the animal experiment results show MenSCs has the tendency of damage. So, imagine the malignant tumor tissue also has the characteristics of directional migration, proposed by the variety of breast cancer cell lines of research in the tendency of MenSCs, participate in the process of testing the paracrine way and receptor ligands way, expounds the inner mechanism; Establish a breast cancer cell lines LuoShu of animal model, using new superparamagnetic iron oxide particles in vitro after mark in MRI dynamic tracer, verify the exact effect and mechanism. And so as to further understanding MenSCs and clinical application and lay a solid foundation.

人经血来源的间充质干细胞（MenSCs），是近年发现的新型成体干细胞，可从女性经血中方便的分离获取和扩增，具有可塑性/低免疫原性以及极低致瘤性等特点。就MenSCs的内在本质研究和应用研究而言，MenSCs对肿瘤的趋向性及内在的作用机理都是一个关键问题。本课题组前期动物实验结果证实MenSCs具有损伤趋向性。因而，设想其对恶性肿瘤组织也存在定向迁移的特性，拟通过研究多种乳腺癌细胞系体外对MenSCs的趋向性，检测参与该过程的各种旁分泌途径和受体配体途径，阐明内在的作用机理；建立多种乳腺癌细胞系的裸鼠动物模型，采用新型超顺磁性氧化铁颗粒体外标记后体内MRI动态示踪，验证确切的效果和机制。从而为进一步认识MenSCs以及临床应用打下坚实的基础。

本课题选择多种乳腺癌细胞系（如MCF-7，MDA-MB-231，Bcap-37，BT-474,4T1等），采用Transwell模型，证实MenSCs在体外对乳腺癌培养上清的趋向性。外分泌的细胞因子如EGF、PDGF、SDF-1α对于MenSCs都有一定的趋化作用，其中PDGF的趋化作用较强。.本项目研究SPIO@SiO2-NH2在体外标记MenSCs的效果，结果显示一定浓度的SPIO@SiO2-NH2标记不影响MenSCs的活力、短期和长期增殖、分化（成骨、成软骨、成脂）、凋亡和坏死，铁染色标记效果可。由于乳腺癌裸鼠移植瘤模型建立中存在的问题，改为结肠癌PDX模型进行体内研究。研究SPIO@SiO2-NH2纳米粒子标记的MenSCs通过腹腔注射及尾静脉两种方式进行体内结肠癌的趋向研究。采用5*10e5MenSCs尾静脉注射裸鼠，1*10e6MenSCs注射裸鼠腹腔，在注射后1天及6天分别进行MRI检测及普鲁士蓝+HE染色鉴定。结果显示：6天后尾静脉注射经SPIO@ SiO2-NH2纳米粒子标记的MenSCs可以趋向到恶性肿瘤组织，但是其中的比例很少，不足以引起MR上的改变；腹腔注射经SPIO@ SiO2-NH2纳米粒子标记的MenSCs未能看到明显的标记细胞。.本课题研究结果表明SPIO@SiO2-NH2能成功标记MenSCs，安全性和有效性可；MenSCs体外具有趋向乳腺癌细胞的作用，EGF、PDGF、SDF-1α可能发挥了一定的趋化作用，在尾静脉注射后也可以趋向恶性肿瘤裸鼠移植瘤组织中，但是其MR监测的效果欠佳。.另外，根据课题组前期建立的同一患者结肠癌原发病灶、淋巴结转移灶、肝转移灶分别建立的裸鼠移植瘤模型（PDX模型），分别采用Avastin、Xeloda及Avastin+Xeloda评估不同位点肿瘤的作用效果及其可能的机制。结果表明同一肿瘤转移到不同位点后，存在一定的异质性，这种异质性可能来源于原发灶的不同位置，也可能来源与转移后的表型改变。具体的机制有待更深一步的研究。