基于蛋白、代谢组学寻常型银屑病微观辨证量化的研究

本试验基于二维凝胶电泳(2-DE)、液相色谱-质谱联用及核磁共振生物学蛋白组学、代谢组学技术，以寻常型银屑病作为研究对象，在宏观辨证基础上，从微观辨证入手对寻常型银屑病证的本质及物质基础进行了研究，揭示及量化寻常型银屑病各证型的代谢标志物及蛋白成分，确定与健康人及各证型之间差异性代谢、蛋白成分。通过量化寻常型银屑病的证型，有利于其证型向国际的推广，有利于为疗效评价提供客观量化稳定指标。

目的：应用同位素相对标记与绝对定量技术（iTRAQ 技术)对寻常型银屑病（血热证、湿热证、血虚证）患者的血清蛋白进行定量分析，探求各证型与健康人差异性表达蛋白，从蛋白组学角度揭示各证型证的部分本质，同时通过证与证两两比较，从蛋白组学角度寻找证型的特症性蛋白，从而更好的为临床辨证服务。方法：寻常型银屑病中医辨证为湿热证、血热证、血虚证。因经费问题课题专家组从湿热证、血热证各40例中选择主证、次证最全的各15例患者作为研究对象，血虚证选择了10例患者作为研究对象，取寻常型银屑病（湿热证、血热证、血虚证）患者及健康人血清，予纯化、去丰度等处理后，SDS-PAGE电泳分离，经iTRAQ特异性标记酶解后的肽段，采用串联质谱分析鉴定出差异蛋白。结果：寻常型银屑病（湿热证）与健康人组中共鉴定出了蛋白质组总数为787个。其中，651个显著性差异蛋白（p <0.05），其中强显著性差异的蛋白有418个（p <0.01）。差异蛋白质组主要为脂蛋白类、补体类及免疫球蛋白类等；寻常型银屑病（血热证）与健康人组中共鉴定出了蛋白质组总数为787个。681个显著性差异蛋白（p <0.05），其中强显著性差异的蛋白有536个（p <0.01）。差异蛋白质组主要免疫相关类蛋白组、脂蛋白类蛋白组等；寻常型银屑病（血虚证）与健康人组中共鉴定出了蛋白质组总数为209个。187个显著性差异蛋白（p <0.05），其中强显著性差异的蛋白有108个（p <0.01），差异蛋白质组主要免疫相关角蛋白组类、脂蛋白类蛋白组、肿瘤相关蛋白等；因湿热证与血热证是证型最接近的证型，所以通过比较分析发现湿热证与血热证之间有19个显著性差异蛋白（p <0.05），其中强显著性差异的蛋白有6个（p <0.01），差异蛋白质组主要为抗菌肽类蛋白组、CAM类、VEGF受体类、TGF-β1等。取得成果：培养硕士研究生3名，已发表文章3篇，现已投稿2篇，正撰写的文章2篇，预计发表文章7篇