药用植物离体培养系统中物理方法和机制的研究及其应用

本项目的主要研究内容是，探索启动子上转录调控因子识别序列外甲基化的生物学功能。以SV40和CMV启动子为材料所取得的实验结果表明，在SV40启动子的转录因子结合序列内和结合序列外引入2个甲基化位点，以及在CMV启动子的CAAT框第二邻位引入甲基化位点，均未影响报告基因的表达水平。这表明，启动子中转录因子识别序列外少数位点的甲基化对转录的影响，不象外甲基化对限制酶活力的影响那样敏感。因此，启动子调控元件外CpG甲基化对转录的微调作用可能缺乏普遍意义。也就是说，本研究得到的是负结果。但是，外甲基化抑制限制酶活性的机理研究，以及甲基化DNA在细胞中所处状态对基因表达的影响的研究，是甲基化生物学功能研究的新发现。