肿瘤细胞自噬小体活化B细胞及其机制的研究

临床资料显示：肿瘤患者（特别是晚期患者）体内常出现多种自身抗体，但其产生机制及作用并不清楚。.申请者所在课题组前期研究显示：① 肿瘤细胞的自噬小体是 "交叉提呈"肿瘤抗原的有效载体，基于自噬小体的肿瘤疫苗能诱导具有治疗效果的T细胞应答；②肿瘤细胞自噬小体能在体外刺激B细胞扩殖并分泌IgM和IgG类别的Ig,但其中的机理尚不清楚。.本项目拟以肝癌细胞为模型、提取多种肝癌细胞自噬小体并以正常细胞自噬小体为对照，以纯化的小鼠B细胞及B细胞株为研究对象，探讨①肿瘤细胞自噬小体刺激B细胞的作用方式(直接还是间接刺激B细胞);②肿瘤细胞自噬小体刺激B细胞是否具有抗原特异性？③肿瘤细胞自噬小体作用B细胞的分子机制等科学问题，阐明上述问题将有助于理解肿瘤细胞自噬小体与B细胞应答的关系、为理解肿瘤患者产生自身抗体的机制提供新的思路。

前期研究，我们发现肿瘤细胞来源的自噬小体（DRibbles）能够作为交叉提呈抗原的有效载体，诱导初始T淋巴细胞的抗肿瘤免疫应答。然而DRibbles对B细胞的作用还未有深入研究。在本课题研究中，我们通过体内和体外实验探讨了B细胞对肿瘤细胞来源DRibbles的识别、摄取作用机制，以及B细胞摄取DRibbles后的活化、增殖、抗体表达及抗原提呈能力。结果显示：B细胞能够直接摄取肿瘤细胞来源的自噬小体从而被活化，活化的B细胞表面高表达多种活化分子，同时分泌高水平的特异性抗体和多种细胞因子。摄取了DRibbles的B细胞能够有效提呈抗原活化效应T细胞。B细胞识别、摄取自噬小体的方式可能是通过细胞表面受体与自噬小体相结合。其中TLR2是重要的受体之一，TLR2识别自噬小体之后可以通过下游的MyD88向胞内传递活化信号。这些结果有助于我们更好的理解肿瘤细胞自噬与B细胞免疫应答之间的关系。