大肠杆菌多顺反子表达载体中各基因表达水平的定量研究

随着后基因组时代的到来，人类将克隆到越来越多的、生物学意义明确的功能基因应用于基因工程对生物体的遗传改良中。但生物体的绝大多数性状和生理功能都是依靠多基因的协调表达而实现的。因此，多基因共表达策略将成为今后基因工程在基础理论与实际应用研究中的主流方向。构建多顺反子表达载体，研究原核生物多顺反子不同间隔区对外源基因表达效率的影响，将对多基因共表达具有一定的指导意义。目前，原核生物间隔区对外源基因表达效率的定量分析尚无报导。本研究拟从大肠杆菌基因组序列出发，对其多顺反子间隔区序列进行分析，选取具有代表性的几种类型加以研究。在大肠杆菌中构建一系列多顺反子重组质粒，以绿色荧光蛋白基因为报告基因，测定其在多顺反子中不同位置，不同数量以及之间所插入不同间隔区序列时，所释放出的荧光强度。比较所得数据，总结出多顺反子间的间隔区序列与多基因表达量之间的关系，从而为实现对不同功能基因表达的精确调控奠定基础。