生长激素释放因子基因转染系统的建立及表达

本研究用化学合成的方法合成了GRF（1-32）基因（包括信号肽），全长186bp，并将合成基因克隆到pBluescript,完成测序，结果与设计完全一致。将克隆的GRF基因克隆到pcDNA3,成功的构建了真核表达载体pcDNA3-GRF(1-32)。经Lipofectine转染到CHO细胞，用RT-PCR和Dotblot检测到了表达。经大鼠垂体细胞体外培养测定了表达产物的生物学活。将质粒和质脂体包裹的质粒注射到大鼠体内，用RT-PCR检测GRF的mRNA，用PCR检测质粒DNA，第30天均为阳性结果。经免疫组化在肌肉组织中检测到了GRF。测定GH浓度表明，注射质粒能刺激GH的释放。